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喂养细胞,选好口粮之BI基础培养基

2020.4.03
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

“喂好傲娇的细胞,口粮选择很重要”

培养基供给细胞营养,

促使细胞增殖,

也是细胞赖以生长的环境。

细胞要吃什么?

选择什么样的培养基?

是细胞培养能否成功的重要因素

经典培养基包括

MEM、DMEM、RPMI1640、DMEM:F12

McCoy's 5A 、M-199

它们各自有什么成分?

适用于什么细胞?

我们又该如何选择?

结合BI生产的基础培养基,我们对以上问题做了如下总结:

1. MEM  

Minimal Essential Medium是最基本的培养基, 设计之初是为了培养HeLa细胞以及部分哺乳类的成纤维细胞。MEM含有12种必需氨基酸、谷氨酰胺和8种维生素,适合多种细胞单层生长。以MEM为基础,Stanner利用Earle'sBalanced Salts和非必需胺基酸(NEAA)进一步配制成MEM-Alpha培养基,可广泛用于哺乳动物细胞的培养。

2. DMEM 

Dulbecco’s Modified Eagle Medium(DMEM)是目前最常使用的改良式Eagle's培养基。DMEM与MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。主要用于快速生长的细胞,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)两种。DMEM含更高浓度的NaHCO3,要用10%的CO₂来平衡,当然也可以在较低CO₂浓度下使用。

DMEM-高糖(标准型)更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差,但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养,也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。

DMEM-低糖(标准型)适于依赖性贴壁细胞培养,特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。

3. RPMI-1640

RPMI-1640营养成分比较简单,比DMEM少一点糖和谷光甘肽,广泛应用于许多种正常细胞和肿瘤细胞、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-15上皮细胞等均可参考使用。

4. DMEM :F12

F12培养基成分丰富,含有多种微量元素,和DMEM以1:1结合,称为DMEM:F12培养基,作为无血清培养基的基础,以利用了F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。
该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力,可以在DMEM:F12(1:1)中加入15mM HEPES缓冲液。

5. McCoy's 5A

McCoy's 5A   Medium  最早是用于肉瘤细胞的培养所设计,可支持多种(如骨髓、皮肤、肺和脾脏等)的原代细胞的生长。除适于一般的原代细胞培养外,主要用于作组织活检培养、一些淋巴细胞培养以及一些难培养细胞的生长支持。

6. M - 199

M-199培养基由Morgan等人研制,是第一个具有确定化学成分的细胞培养液,原本是用来研究鸡胚原代细胞。除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,此培养液必须辅以血清才能支持长期培养。主要用于鸡胚成纤维细胞培养。M-199可用于培养多种种属来源的细胞,并能培养转染的细胞,广泛用于病毒学、疫苗生产。

除了上述培养液,BI还提供DPBS、PBS、D-Hanks和细胞培养用水。一般细胞培养时用PBS/DPBS就可以了,Hanks/DHanks一般用到原代细胞消化分离操作实验中,如果分离时消化时间较长,建议Hanks。

BI 基础培养基

BI液体培养基相关信息:

此外,BI还拥有多种细胞辅助试剂,如下:

(部分文字引用)


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