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细胞污染过程中常见的微生物污染和预防(一)

2020.5.05
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

导语

你正在细胞科学的海洋愉快遨游,如果有一天,细胞污染忽然跑过来说:“大家好,我是细胞污染~”这时候,科研的小船说翻就翻。

今天Esco就同大家浅谈细胞污染,抛砖引玉。

体外细胞污染分类: 物理性、化学性、生物性污染。其中生物性污染常见且造成的后果也较为严重,培养的细胞一旦遭到微生物污染,将具有不可逆转性。轻则污染细胞废弃,重则连带污染培养箱内的其他细胞,甚至整个实验室的环境,给科研工作带来严重的损失和威胁。

一、怎样判断你的细胞是何种生物性污染?

1.细菌污染

常见细菌种类为大肠杆菌、枯草杆菌、假单胞菌等(革兰阴性菌)、 葡萄球菌等(革兰阳性菌),其中革兰阳性菌较为多见。

主要来源:操作不当或是器材消毒不严,或是各种营养成分隐性污染细菌没有被检测出来所造成的。

特点:污染速度快,易被发现。多数情况下细胞培养液短时间内变黄,培养基1~2d就会变浑浊,pH值降低,倒置显微镜下观察,可见胞浆出现大量颗粒,细胞变圆或崩溃,从壁上脱落,培养液中有大量圆球状颗粒物漂浮,呈细沙状,污染较轻时可见小菌体在细胞间运动。

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图1 细菌污染

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图2 洋葱佰克霍尔德菌污染

2.真菌污染

污染培养细胞的多为烟曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。

主要来源:实验人员(实验服)

特点:短期内不会引起培养液的浑浊,可在培养液中形成白色或黄色漂浮物,一般肉眼可见,较易被发现,4d左右才可在高倍镜下观察到丝状、管状或树枝状菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中,有些真菌开始很像死细胞碎片,只是它很多很多的小块很清楚,象珊瑚状,不象细胞碎片分不清,慢慢的会长出很细的黑色丝状物。

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图3 真菌污染

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图4 霉菌(丝霉)污染 培养基呈淡紫色,或不变色,但会变得粘稠,并且具有季节性,长蘑菇的季节很容易污染这种菌类。


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