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纸层析分离中的点样后展开前，将滤纸和层析缸用配好的溶剂蒸汽来饱和，这个过程称为平衡。若不经过平衡，滤纸和层析缸未被溶剂蒸汽饱和，在层析过程中滤纸会从溶剂中吸收水分，溶剂会从滤纸表面挥发，从而改变溶剂系统的组成，严重时滤纸上会出现不同水平的溶剂前沿，严重影响层析效果。平衡一般在密闭的层析缸内进行，所用溶剂必要时用离心机进行预处理。
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