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USP和EP收录电雾式检测器(CAD)方法——CAD检测器大揭秘

2020.5.11
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

日前,USP收录的脱氧胆酸(USP 40 NF 35 S1)和EP收录的钆布醇(Ph. Eur. 04/20/16:2735)两个品种,主成分含量或杂质分析项方法均采用了电雾式检测器(CAD)进行测定,这无疑是官方对这个新型检测器的最大认可。另外EP论坛上推荐采用CAD检测的品种还有天冬氨酸及其杂质、托吡酯及其杂质和伊班膦酸钠及其杂质;USP论坛推荐的CAD检测品种还有琥珀酸美托洛尔弱紫外吸收和无紫外吸收杂质。

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脱氧胆酸(USP)


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钆布醇(EP)

电雾式检测器(CAD)属于通用型检测器,是一种新型原理的,高灵敏度,重现性好的检测器,它基于雾化检测器的原理,洗脱液经雾化后形成颗粒,经过蒸发管干燥后与带电氮气碰撞,使得分析物颗粒表面带上正电荷,最后通过静电计测量分析物颗粒表面的电荷量。

CAD的定量基础:峰面积与分析物颗粒表面所带电荷量相关,分析物颗粒表面电荷量与分析物质量相关。电雾式检测器基于独特的新型设计原理,解决了其他检测器设计与原理上的一些局限性,达到了通用性目的,能为难挥发化合物提供一致响应性,同时能达到较高的灵敏度和低检测极限,很容易检测到纳克数量级的化合物,并且与液相色谱分离系统联用,其重现性、稳定性很好,因此能准确的用于定量分析或半定量分析,能定量大部分非挥发性和半挥发性的有机物。

该电雾式检测器自2004年10月一经推出,就相继获得了仪器行业的最高荣誉,获2005年PITTCON“撰稿人”银奖和素有“发明领域的诺贝尔奖”2005年R&D100 奖。最近详细介绍该检测器原理与技术应用的专著《Charged Aerosol Detection for Liquid Chromatography and Related Separation Techniques》也已出版,为该检测器的使用者提供了全面详尽的技术指南。


 

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CAD检测器

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CAD检测器原理

与ELSD相比,CAD具有更高的检测灵敏度、更好的日内和日间重复性和更宽的线性范围。很多ELSD无法检测到的杂质,在CAD上具有较好的响应。与ELSD相比,难挥发性化合物的CAD响应与分析物的理化性质无关,在进入CAD的流动相组成不变的情况下,进样量相同的不同化合物具有相同的CAD响应。换言之,CAD可用已知化合物的线性曲线定量未知化合物。此外,CAD做化合物纯度分析所得数据更接近样品的真实组成。

与UV相比,CAD的响应不受化合物紫外吸收基团的影响,半挥发和难挥发的化合物都能在CAD上具有较好的响应,可以检测UV无法检测到的弱紫外吸收化合物。

电雾式检测器有如下主要特点:

- 基于该检测器的设计原理与结构,该检测器总体上灵敏度高,如在分析葡萄糖、蔗糖和乳糖时,能检测到0.5ng的柱上样量;

- 更高的响应一致性,如对24种化合物在相同色谱条件下分别直接进样1μg(不接色谱柱),其响应的峰面积的RSD值仅为10.7%;

- 动态检测范围宽,达3-4个数量级;

- 应用广泛,能分析小分子、大分子化合物,如氨基酸、蛋白、聚合物等;

- 使用操作直观简单,维护十分简便,工作流速0.01-2.00 ml/min,兼容Micro-LC和UHPLC。

从2004年问世以来,CAD在药物、蛋白、磷酯类、类固醇类、低聚糖类、表面活性剂类、碳水化合物、聚合物、对离子和多肽类的分析等多领域展现出无可替代的优势。

CAD检测方法被USP和EP收录对我们国内的CAD用户是一个极大的鼓舞。这不仅是USP和EP首次收录CAD检测技术,这两个方法的实施细节更是为以后其它CAD相关方法的撰写提供了蓝本。随着我们在日常的检测中越来越依赖于这款检测器,期待在不久的将来采用这款检测器的检测方法被我们中国药典所收载。



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