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Myc标签融合蛋白-检测,封闭应用数据

2020.5.11
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

Myc 标签融合蛋白 - 检测,封闭

Myc Tag来源于c-myc基因表达产物,其序列为EQKLISEEDL。以高亲和力闻名的Myc Tag的单克隆抗体(克隆号2D5),可以检测天然和变性的Myc融 合蛋白,被广泛用于WB、IF、IP实验。在天然洗脱条件下,使用Myc标签多 肽来与重组蛋白进行竞争,可温和洗脱Myc标签蛋白质。

Fig.1. Immunofluorescence staining (1:2,000) of Myc fusion protein in 293 cells with red and counterstained with DAPI.

Fig.2.Western blot analysis of 1ug Myc fusion protein with Anti-Myc mouse monoclonal antibody (2D5) in 1:5,000 dilution (lane A) and 1:10,000 dilution (lane B).

Fig.3.IP (1:200) - WB (1:5,000) analysis of Myc fusion protein expression in 293 cells. Untransfected 293 cell lysate (lane A), transfected 293 cell lysate with Myc-tag protein (lane B); IP transfected 293 cell lysate with normal Mouse IgG (lane C) or with Anti Myc tag mAb (lane D) , and without both normal Mouse IgG and Myc tag mAb (lane E).

在1985年开发出鼠抗c-myc标签抗体并被作为免疫化学试剂用于细胞生物学和蛋白质工程领域中。Myc标签相当于人的c-Myc 410-419位肽段( 序列为:EQKLISEEDL)。Myc标签可放在C端或N端,但Myc重组蛋白的低pH洗脱条件往往会降低蛋白质的活力,因此Myc标签系统广泛应用于检测但很少用于纯化。Myc标签已成功应用于WB杂交技术、免疫沉淀IP和流式细胞术中。因此可用于检测重组蛋白在细菌、酵母、昆虫细胞和哺乳细胞中的表达情况。


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