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FRET成像在生物医药领域中的应用(二)

2020.5.12
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

接下来通过该生物敏感器,作者成功实现了在活细胞内对Aurora kinaseA时空激活调控的观察,证明其在G1时期被激活,并通过TPX2和CEP192蛋白协同调节微管的稳定性。

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4 TPX2CEP192G1时期激活GFP-AURKA-mCherry

Aurora kinase A是公认的治疗癌症的药物作用靶点,由于其表达量低,在活细胞内对其进行跟踪研究非常困难。该生物敏感器基于FRET技术构建,通过FLIM-FRET技术可成功实现在低表达量的条件下对Aurora kinase A展开研究,因此该生物敏感器对于针对Aurora kinase A的信号通路研究及癌症药物筛选具有重要意义。

2)另一篇发表在oncotarget上的文章“HER2-HER3 dimer quantification by FLIM-FRET predicts breast cancer metastaticrelapse independently of HER2 IHC status”利用了FLIM-FRET技术检测乳腺癌病人中HER2-HER3二聚体的水平。HER2表达水平升高是乳腺癌诊断中的一个重要指标,然而并不能用来检测仅由HER2-HER3二聚体升高引起的乳腺癌,因此急需新的检测方法。本文章基于FLIM-FRET技术顺利实现了对HER2-HER3二聚体水平的检测,因而成为检测由HER2-HER3升高引起的乳腺癌的一个新型诊断方法,对乳腺癌发生及愈后诊断具有重要意义。

 

 

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通过FLIM-FRET技术检测HER2-HER3二聚体水平。

小结

LAS X软件中提供了专门的FRET技术操作向导,可分别通过FRET-AB(acceptor photo-bleaching)和FRET-SE(sensitizedemission)两种方法对样本进行检测,用户只需根据操作向导一步步操作就可轻松得到样本的FRET数据。

6 LAS X软件中的FRET操作向导。

对于其他高级成像模式,如FRAP、Hyvolution等,用户同样可根据相应操作向导快速实现数据的采集。结合LAS X强大的图像后期处理及分析功能,便可轻松获得可靠的数据。


 

参考文献:

1. Giulia Bertolin et.al., A FRET biosensor revealsspatiotemporal activation and functions of aurora kinase A in living cells,Nature Communications, 2016 Sep.

2. Gregory Weitsman et.al., HER2-HER3dimer quantification by FLIM-FRET predicts breast cancer metastatic relapseindependently of HER2 IHC status, oncotarget, 2016 July.


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