分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

支原体污染及检测

2020.5.12
头像

王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

(1)支原体污染在细胞培养中最常见、不易被查觉,但支原体污染可显著影响细胞功能干扰实验结果。支原体是介于细菌和病毒之间的目前所知能独立生活的最小微生物,它无细胞壁,形态呈高度多形性,最小直径0.2um,可通过滤器。 

目前通过对国内100余株/系细胞的检测,形势不容乐观。污染率达30% ~ 60% 。课题组从国外引进细胞株/系也经常出现支原体的污染。支原体在污染细胞后,它通过影响细胞的DNA、RNA 的合成及急速消耗培养基中的氨基酸来抑制细胞的生长,并能降低细胞的融合率。因此,在运用各种细胞系进行实验研究时,首先要证明所用细胞有无支原体的污染。 

(2)支原体污染后,培养基可不发生浑浊,细胞病变轻微或不明显,因此难以发现。目前,支原体检测的方法有以下几种。

(a)相差显微镜观察;

(b)低张处理地衣红染色法;

(c)荧光染色法;

(d)酶标法;

(e)PCR法:使用该方法进行检测。

优点:灵敏度高,检测耗时短,样品量小。

(只需50ul细胞培养用液上清)。

缺点:引物及制剂费用较高。


互联网
文章推荐