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贴壁细胞培养方法(平面2D培养、搅拌式培养、微载体培...

2020.5.12
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

贴壁细胞培养方法(平面2D培养、搅拌式培养、微载体培养)优缺点比较


贴壁细胞-----真正的贴壁、线性的放大(潮汐式反应器)

细胞反应器是某种细胞的培养生长代谢过程的反应器,这个过程需要控制的条件比较多,比较复杂。

细胞反应器根据工作方式和功能的分类:

一、平面2D培养(培养皿、方瓶、滚瓶):

优点:成本低,利于种子细胞制备,前期条件摸索;

缺点:1.培养数量少,规模扩大需要增加平面面积;

          2.批次培养质量不可控,产物回收检测手段有限;

          3.培养基使用量较大;

           4.50个单位以上处理人力已非常吃力,人力成本较高;

           5.配套基础设备数量同步上升(如二氧化碳培养下等);

二、搅拌式培养(搅拌):

优点:技术成熟,专门用于细胞壁较厚的微生物培养或悬浮型培养体系;

缺点:

1.剪切力较大,放大后剪切力剧烈上升,贴壁细胞容易脱落死亡;

2.放大后培养基消耗较大;

3.占地面积较大,操作复杂;

4.容易产生气泡,不利于培养体系稳定;

三、微载体培养(固体床、摇摆式):

优点:细胞附着程度大于搅拌器式,贴壁细胞培养效果明显上升;

缺点:

1.贴壁细胞面临的剪切力问题没有得到彻底改变;

2.相较于平面培养稍微改善,但溶氧量还是受到限制(固体床尤为明显,溶氧量存在纵向和横向梯度);

3.微载体与细胞分离困难,细胞聚团现象严重;

4.放大效果较差

、潮汐式(呼吸式)培养:

1.贴壁细胞;

2.3D培养;

3.0.5升到5000L的线性放大;

4.极高的细胞密度;

5.成本最低的:细胞被固定在专用非微型载体中,细胞收获或产物收获分离更容易;

6.双向供氧方式:达到极限供氧状态;

7.零剪切力、无泡沫:缓慢的液面上下移动;

8.3个月以上连续培养;



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