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使用CytoFLEX流式细胞仪+荧光染料CFSE检测细胞增殖

2020.5.27
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

荧光染料CFSE(CFDA-SE),是一种可对活细胞进行荧光标记的新型染料,可以标记活体细胞。其基本原理如下:CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内与胞内蛋白共价结合,水解后释放出绿色荧光。在细胞分裂增殖过程中,它的荧光强度会随着细胞的分裂而逐级递减,标记荧光可平均分配至两个子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半,根据这一特性,它可被用于检测细胞增殖,细胞周期的估算及细胞分裂等方面。

材料与方法
1.试剂
2016121135856248.jpg

2.样品制备
201612113592926.jpg

数据分析
在FSC/SSC上圈出淋巴细胞,使用FSC-W/FSC-A排除黏连体,CFSE/CD19图中圈出CD19阳性细胞,使用CFSE单参分别看淋巴细胞与CD19阳性(B细胞)的增殖情况。


结果
对照组:
2016121135914720.jpg

实验组:
2016121135923331.jpg 

结果显示,经过CpG 刺激3 天后的CD19 阳性细胞增殖效率比对照组有明显的提升(23.44%:18,70%)。
CytoFLEX 能明显的区分淋巴细胞增殖的不同代数,从图中看至少有明显的5 代细胞,而且CD19 阴阳性区分也十分明显,体现出了出众的仪器灵敏度与分辨率。


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