大鼠(5-NT)ELISA试剂盒技术原理

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产品名称：大鼠(5-NT)ELISA试剂盒技术原理

英文名称：Rat 5-Nucleotidase,5-NT ELISA Kit

产品编号：QY-SZ2075

产品性状：液体

产品用途：科研实验专用

产品规格：96T/48T

实验原理

用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

试剂盒组成：

封板膜:2片（48）/2片（96）

说明书:1份

密封袋:1个

标准品：2700ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存

酶标包被板:1×481×962-8℃保存

样品稀释液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

显色剂A液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

显色剂B液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

终止液:3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存

浓缩洗涤液:（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存

标本的采集及保存

1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000 x g离心15分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000 x g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

4. 细 胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右 （2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5. 组 织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的 PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。

7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。