一种基于量子点探针和侧向流层析的快速灵敏的检测禽...

一种基于量子点探针和侧向流层析的快速灵敏的检测禽流感病毒的方法

一种基于量子点探针和侧向流层析的快速灵敏的检测禽流感病毒的方法 摘要：我们开发了一种新的快速、超灵敏的检测禽流感病毒的荧光免疫检测方法，该方法整合了侧向流层析技术和无标记、高发光的量子点新材料。通过对侧向流试纸条上进的的夹心免疫反应，金纳米粒子标签在检测线上被捕获，同时被释放的大量金粒子作为信号转导的桥梁，被量子点通过荧光淬灭的方法检测到。在最佳的条件下，量子点荧光强度在AIV   0.27-1.2ng/ml的范围内呈线性关系。检测极限达到0.09ng/ml，比ELISA高出100倍。其灵敏度和特异性反应具有较高的重复性。六组平行检测重复性荧光信号产生的行动标准差为4.7%。该方法能够直接用于临床样品检测，而不需要预处理。与病毒分离（胶体金）方法相比，该方法具有高效率（90.0%）、高灵敏度（100.0%）、高特异性（88.2%）的优点。新的方法能够快速、灵敏的定量检测禽流感病毒，在医疗诊断领域具有较好的前途。   1、 采用荧光免疫分析方法检测禽流感病毒的原理图   2、胶体金与禽流感病毒抗体偶联效果，与偶联前相比，偶联后吸收峰出现红移，吸收峰波长变大，通过电镜成像分析，偶联后直径变大 3、采用负染色电镜成像技术显示胶体金与AIV抗体偶联物与抗原AIV结合后，整体直径变大，通过胶体金定性分析，T线有明显条带，说明在T线中发生抗体抗原免疫反应。 4、不同的金离子浓度对I₀/I的影响，随着金离子浓度的升高，I值会逐渐降低，比值逐渐升高 5、HCL和Br2对溶解释放出金离子最佳浓度的优化，最后选择0.15mol/L HCl 和0.8mol/L/Br2复合物   6，AIV浓度与量子点相对荧光强度的关系图，在0.27–12 ng /mL内呈直线关系，线性关系很好随着AIV浓度的增加，逐渐趋向水平 7，文章提供的方法与几种AIV常规检测方法对比，灵敏度高很多   8，通过检测20种临床样品，与病毒分离方法相比，文献提供的方法拥有其90.0%的效率，100.0% 灵敏度和and 88.2%特异性。