多肽合成的水解影响因素与机制

  水解影响因素与机制

　　多肽合成药物在不同的环境中可以被酸、碱、蛋白酶催化或被金属离子催化水解。例如，在25℃的温度下，二肽甘氨酰甘氨酸在1 mol /LNaOH中水解的半衰期约为2天，在1 mol /L盐酸中水解的半衰期则为150天。而难活化的肽键在钯和铜配合物的催化下能迅速裂解。过去非催化肽键水解并未得到较多关注，直到1988年Kahne和Still用C标记了甘氨酸并使其结合在肽C－末端，在中性pH值范围内和25℃的温度下能监测到释放少量的甘氨酸，它的水解速率为3 ×10－ 9s－ 1，从而推算得出它的半衰期为7年。

　　1) pH因素

　　多肽合成药物在酸性和碱性条件下易水解，在中性条件下水解速率最低。Kahne和Still用C标记了一个四肽的C －末端甘氨酸，在pH值为0到14的范围内和25℃的温度下，测定多肽合成的水解情况，并绘制出了水解速率和pH值的曲线关系。其中:在pH = 7时多肽的水解速率为3× 10－ 9s－ 1，从而推算得出它的半衰期为7年。

　　2) 温度因素

　　多肽合成药物在高温下的水解速率明显快于室温下的水解速率。两者相差较大，一般相差在10³～105倍。Kahne和Still用C标记了一个四肽，测定该四肽在热冷不同树脂下的水解情况。可以看到，尽管随着时间的推移热树脂的水解始终大于冷树脂水解，但在1 500 min后保持相对平衡。Ｒadzicka等检测了5种二肽在150℃和25℃下的水解速率，发现150℃下的水解速率约为25℃下的105倍。

　　3) 酶催化因素

　　多肽药物不同位置的肽键需要采用不同的酶和不同的温度进行水解，而且不同位置的水解速率也不相同。Ｒadzicka等根据前人检测的C － 端 肽 键( 如AcGG) 与 羧 肽 酶B( 23℃)、内部肽键( 如AcGGNHMe) 与血管紧张素转换酶( 37℃)、二肽键( 如GG) 与腹水瘤二肽酶( 40℃)3个位置肽键的水解速率以及半衰期。再加上检测3类肽键在无酶催化条件下的反应速率与酶催化后的水解速率，最终得出结论:羧肽酶B是这3类酶中催化能力最强的酶。