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捕食应激致大鼠的持续性情绪唤醒障碍(二)

2020.6.16
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王辉

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方法:

模型制备:先将大鼠放入捕食应激实验箱的小笼中,再将1只饥饿的猫放入实验箱中,使猫与大鼠无生理伤害性接触,致大鼠出现轻微惊恐性颤动及因惊吓所致呼吸急促而快速鼻翼煽动6~8 min,以确保实验大鼠相似的应激强度及稳定的应激效应。正常对照组大鼠除不接触猫外,其他处理程序相同。

 

情感行为观察:于捕食应激后1,14 d,1,2 和4 个月时分别取正常对照组及捕食应激组大鼠各12、15只,观察其情感行为改变:①大鼠运动活性:将大鼠轻轻放入旷场行为观察箱中央小方格内,观测5 min 内动物的活动情况。计分标准:大鼠1 /2 以上身体从所在方格进入相邻方格,即爬越1 次计1 分,所得总分用于评价其运动活性改变。②探究行为:方法同上,观察5 min内大鼠后肢性站立计分改变。计分标准:后肢性站立1次计1分,总分用于评价其探究行为改变。③拒俘反应性:以动物从未接触过的手套轻抓大鼠,观察其反应。记分标准:0 很容易抓取动物;1 尖叫或回避;2 尖叫并回避;3 逃脱;4 逃脱并尖叫;5 咬或试图撕咬手套;6主动跃起攻击;以此评价动物恐惧与冲突素质特征改变[6]。④高架十字迷宫实验:将大鼠置于迷宫中央,头朝闭臂。分别记录5 min 内大鼠进入开臂和闭臂的次数和在两臂滞留时间(以四肢全部入臂或出臂为准),计算大鼠进入开臂的次数和在开臂滞留时间分别占总次数(进入开臂与闭臂次数之和)及总时间(在开臂与闭臂滞留时间之和)的百分比,以此为评价焦虑指标。

 

空间学习和记忆能力观察:采用Morris 水迷宫法[8],观察捕食应激后第1 天,2 周时空间学习和记忆能力的改变。第1,2 天为空间觅向训练:第1 天训练9 次,2 min /次,记录大鼠从不同象限入水至发现并爬上平台的时间为训练潜伏期,每3 次的均值作为平均训练潜伏期;第2 天重复进行6 次训练;比较所得的5 个平均训练潜伏期变化以分析动物获取空间信息的能力。第3 天进行空间定向能力测试:先将平台移去,再将大鼠放入水中2 min,记录它在四个象限中停留时间的百分比,以判断动物记忆储存及提取再现能力。

 

主要观察指标:大鼠爬越行为、后肢性站立、拒俘反应性、高架十字迷宫开臂次数与开臂时间、Morris 水迷宫平均训练潜伏期及不同象限停留时间百分比。

 

统计学分析:由成都军区成都总医院信息科统计室采用SPSS 9.0 软件进行单因素或双因素方差分析,以及各组均数的S- N- K法(用于方差齐性的大鼠爬越行为、拒俘反应及开臂次数百分比的比较)和Tamhane’sT2法检验(用于方差不齐性的大鼠后肢性站立、开臂时间百分比及空间学习和记忆能力改变的比较)。

 

2 结果

 

2.1 实验动物数量分析参与实验大鼠135只在实验过程中无死亡,均进入结果分析。

2.2 大鼠捕食应激后不同时间情感行为观察结果

2.2.1 大鼠捕食应激后不同时间旷场行为改变和高架十字迷宫行为改变结果。

表1 显示,捕食应激大鼠应激后1个月内旷场爬越行为明显减少,显示其运动活性降低,之后渐恢复正常;而4个月时后肢性站立仍显著减少,表明其探究行为明显降低。捕食应激后4 个月内,应激大鼠进入开臂次数百分比和开臂滞留时间百分比均明显降低,并于应激后1 个月时稍有恢复,但2个月后则进一步降低。

2.2.2 大鼠捕食应激后不同时间拒俘反应性结果见表2。大鼠拒俘反应性在应激后2个月内明显增强。


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