灵敏度远远没有滤光片酶标仪好的原因，也正因为这个原因，在高端光栅型的酶标仪也要配备滤光片模块才能进行TRF、TR-FRET等高灵敏度需求的检测。
| 除了光能量秏损较大外，光栅系统的另一个问题是波长带宽狭窄。市面上的光栅系统的波长带宽一般为10nm，有些系统可把带宽调至15nm来增加灵敏度。如果要检测480nm的波峰，光栅系统的激发波长范围大概为475nm-485nm左右。如果只是要检测单一波峰是可以的，但是大部份荧光探针的激发和发射光都不是单一波长，而是一个波长范围。例如图3为常见的荧光染料激发光和发射光光谱，可见无论是激发和发射都是一个波段，并非单一波峰。如果在光栅系统下，基于带宽的限制，它只能选用激发和发射的最高效率的波长去做检测。相反，在滤光片系统的情况下，使用者可按需要采用带宽较大的滤片，例如：480/40nm，去做激发和发射光检测。这样，可用的激发和发射光波段便会大大增加了，见图4。由于可用的波段较宽，用来激发和被检测的发射光也较多，所以光能也自然较大。另外一个例子是：当进行TRF、TR-FRET这类高端应用时，由于激发光谱和发射光谱的距离非常远（图5为Eu的激发/发射光谱图），这种情况下，滤光片系统可以非常方便的选择可产生最高信噪比的滤光片组合（尽可能宽的带宽，比如40nm甚至更大）以获得最大的信噪比。而由于光栅系统自身固有的缺陷（带宽小、滤光效率低），其获得的信噪比远远无法跟滤光片型酶标仪相媲美。光栅系统还有另外一个问题，就是过滤出来的波长会有伪尾的出现。伪尾就是指在选定的波长以外，但与被选的波长很接近的杂光透过光栅进入了样本和检测器。这一些杂光的出现，再加上背景噪音讯号会使仪器的灵敏度受到限制，使其很难去检测一些很弱的荧光讯。光栅型酶标仪解决伪尾的方法是增加一个Cutoff滤光片进一步滤光；另一个方法是再加一级光栅（双光栅系统），导致滤光效率也进一步降低。 |
集两家之长? |
鉴于市场上开始意识到光栅和滤光片的问题，于是一些酶标仪厂家推出了一些称为混合型 (Hybrid Technology)的型号。这些混合型系统配有滤光片和光栅两种光路，用户可以按需要选择其一去做检测。这种概念听起来是不错，可是实际上混合型的酶标仪并没有解决滤光片和光栅互有缺点的问题。它只是把两种技术放在一起，供使用者选择，每种技术本身的问题仍然存在。这种仪器的卖点似是市场推广的手法较真正解决问题为多。 |
·真正的决解方案—线性渐变滤光片（LVF）技术 |
要真正集两家之长，就是要使酶标仪能拥有滤光片的高信噪比同时也拥有光栅的灵活 |
性。德国专业酶标仪厂家BMG Labtech刚在今年七月推出了突破性的新技术—线性渐变滤光片（LVF）技术。这个技术利用渐变滤光片技术实现了光栅的功能，且同时保证了滤光片本身的高信噪比特性。LVF系统既可以随意挑选波长和进行波长扫描。更具突破性的是，LVF技术完全克服了传统光栅带宽选择的局限性，可按实验需在8nm-100nm之间选择任意带宽（0.1nm递进）！也就是说LVF集合了滤光片的高信噪比、更大弹性带宽选择的优点和传统光栅波长选择和波长扫描等所有优点，诸多优点的有机结合造就了新一代的多功能酶标仪——LVF酶标仪。 |
现在，LVF酶标仪的使用者可以利用LVF技术像传统光栅酶标仪一样去自由制定任意波长的滤光片。LVF酶标仪与传统滤光片酶标仪相比较，在普通荧光检测、TRF、TR-FRET等高端领域检测效果与滤光片系统酶标仪同样出色！LVF技术是市场上唯一可以改变波长和带宽的滤光片/光栅，这种特破性的设计使LVF酶标仪可完成任何波长、任何带宽、任何检测的完美检测！ |
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