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移液器的种类和使用方法

2020.6.22
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

准确的分析方法对于生物化学实验是尤为重要的,在各种生物化学分析技术中,首先要熟练掌握的就是准确的移液技术。为此我们就需要用到各种形式的移液器,其中有一些是我们在化学实验中未用过而在生化实验中却是常用的。下面莱贝
来具体说说这些各式各样的移液器
1 滴管
滴管使用方便,可以用于半定量移液,其移液量为1mL~5mL,常用移液量程为2mL,可以更换不同大小的滴头。滴管有长、短两种,新出的一种带刻度和缓冲泡的滴管,能比普通滴管更准确地移液,并且防止液体吸入滴头。
2 移液管(吸管)
移液管(吸管)使用前应先清洗至内壁不挂水珠,1mL以上的吸管可用吸管专用刷刷洗,0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗涤剂浸泡,必要时可以用超声清洗器清洗。由于铬酸洗液致癌,要尽量避免使用。若有大量成批的吸管洗后需要冲洗,可以使用冲洗桶,将吸管尖端向上置于桶内,用自来水多次冲洗后再用蒸馏水或无离子水冲洗。
吸管分为两种,一种是无分度的,称为大肚吸管,精确度较高,其相对误差A 级为0.7%~0.8%,B 级为1.5%~0.16%,液体自标线流至口端(留有残液),A 级等待15s,B 级等待3s。另一种吸管为有分度吸管,管身为一粗细均匀的玻璃管,上面均匀刻有表示容积的分度线,其准确度比大肚吸管要低,相对误差A 级为0.8%~0.2%,B 级为1.6%~0.4%,A 级、B 级在吸管身上有A、B 字样,有”快”字则为快流式,有”吹”字则为吹出式,无”吹”字的吸管不可以将管尖的残留液吹出。吸、放溶液前要先用吸水纸擦拭管尖。
3 微量进样器
微量进样器常常被用作气相和液相色谱仪的进样器,在生化实验中主要是用作电泳实验的加样器。
一般可以分为无存液和有存液两种。
(1)10μL 以下的极微量液体进样。
无存液微量进样器:进样器的不锈钢芯子直接通到针尖端处,不会出现存液。
(2)10μL~100μL 有存液微量进样器:不锈钢的针尖管部分是空管,进样器的柱塞不能到达,因而管内会存有空气或液体,其使用注意事项是:①不可吸取浓碱溶液,以免腐蚀玻璃和不锈钢零件;②因为有存液,所以吸液时要来回多拉几次,将针尖管内的气泡全部排尽;③针尖管内孔极小,使用后尤其是吸取过蛋白质溶液后,必须立即清洗针尖管,防止堵塞。若遇针尖管堵塞,不可以用火烧,只能用φ0.1mm 的不锈钢丝耐心串通;④进样器未润湿时不可来回干拉芯子,以免磨损而漏气;⑤若进样器内发黑,则说明有不锈钢氧化物,可一用芯子蘸少量肥皂水,来回拉几次就可以清除掉。
4 自动移液器
这种自动移液器在生化实验中大量地使用(比如Eppendorf、Biohit以及IKA移液器),它们主要用于多次重复的快速定量移液,可以只用一只手操作,十分方便。移液的准确度(即容量误差)为±(0.5%~1.5%),移液的精密度(即重复性误差)更小些,为≤0.5%。
移液器可以分为二种:一种是固定容量的,比较常用的有100μ L等多种规格。每种移液器都有其专用的聚丙烯塑料吸头,吸头通常是一次性使用,当然也可以超声清洗后重复使用,而且此种吸头还可以进行120℃高压灭菌;另一种是可调容量的移液器,常用的有200μL、 500μL 和1000μL 等几种规格。
可调式移液器(Eppendorf、Biohit以及IKA移液器)的操作方法是用拇指和食指旋转移液器上部的旋钮,使数字窗口出现所需容量体积的数字,在移液器下端插上一个塑料吸头,并旋紧以保证气密,然后四指并拢握住取液器上部,用拇指按住柱塞杆顶端的按钮,向下按到第一停点,将移液器的吸头插入待取的溶液中,缓慢松开按钮,吸上液体,并停留1~2秒钟(粘性大的溶液可适当加长停留时间),将吸头沿器壁滑出容器,用吸水纸擦去吸头表面可能附着的液体,排液时吸头接触倾斜的器壁,先将按钮按到第一停点,停留一秒钟(粘性大的液体要加长停留时间),再按压到第二停点,吹出吸头尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸头,可按下除吸头推杆,将吸头推入废物缸。
自动移液器(Eppendorf、Biohit以及IKA移液器)的使用注意事项是:
①吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入移液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
②为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层”液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
③浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
④可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正移液器,1mL 蒸馏水20℃时重0.9982g。


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