摘要：Handyem在2013推出了革命性的新一代个人型流式细胞仪HPC-100。HPC-100由加拿大国家光学研究所与加拿大航空航天局共同研发，用于空间站宇航员的健康监测。其核心技术是采用光纤微流体设计的“F3FiberFlowFluidics™”流动室，可以实现无鞘液，超小型，防震动等性能。
目前，流式细胞术逐渐成为生命科学研究的常规分析技术，一直以来，流式细胞仪售价昂贵、维护和使用成本高、操作复杂，是制约其成为常规仪器的掣肘。近年来，小型化个人型流式不断涌现，大大弥补了传统流式的不足，逐渐成为实验室的必备仪器。其主要特点是价格低廉、操作简单、维护和使用成本低，但小流式的不稳定性是其最大的问题。
Handyem在2013推出了革命性的新一代个人型流式细胞仪HPC-100。HPC-100由加拿大国家光学研究所与加拿大航空航天局共同研发，用于空间站宇航员的健康监测。其核心技术是采用光纤微流体设计的“F3FiberFlowFluidics™”流动室，可以实现无鞘液，超小型，防震动等性能。
图一：ZLF3FiberFlowFluidics™流动室
HPC-100具备其它流式细胞仪所不具备的三大创新。
首先是抗震性。光纤介入流动室，避免传统流式细胞仪流动室中反射和聚焦光斑的偏移导致的检测误差，HPC-100是目前唯一具有防震性能的流式细胞仪，是最稳定的流式细胞仪。
其次是样本回收。无鞘液设计并非Handyem首创，但进行细胞回收却是流式中大胆的突破，无鞘液可避免细胞被稀释而破裂，检测完之后回收细胞可进行显微镜观测或再培养。
第三是小体积。HPC-100是流式小型化的集大成者，体积仅是是目前主流的小型流式细胞仪体积的三分之一，可灵活的放置在安全柜或手套箱中。
图二：HPC-100的体积
除了硬件设计上的创新之外，HPC-100也注重数据的质量，与传统大型流式细胞仪的数据相比具有很强的说服力。如图所示，大型流式细胞仪配置的高端激光器的数据与HPC-100配置的经济型激光器检测相同样本数据比较（图三）。
图三：流式细胞仪直接检测新鲜外周血溶血后的单核-淋巴细胞
HPC-100选配的532 nm激光是激发PE标记的最佳激发波长，使用SPHERORainbow
微珠（SpherotechPNRCP-30-5A）与其他市售配置488nm蓝色激光器的流式细胞仪进行灵敏度和分辨率对比。以35ul/min的流速检测微珠，分别以585/40、LP642
和 785/62nm的滤光片收集PE，PE-Cy5和PE-CY7通道的荧光信号，进行分析。
结果显示HPC-100线性度约2％，大大优于配置488nm蓝色激光的其它流式细胞仪的5％线性度（图四），较小峰的CV显示更准确的数据。此外，HPC-100能检测到约70 MEPE（等效藻红蛋白分子），优于流式细胞仪的188 MEPE。
532 nm激光器在检测PI和PE及偶联染料时，相对于488nm激发有优势。
图四：532nm与488nm激光器检测PE性能的比较
HPC-100具有广泛的应用领域（包括且不限于）
• 细胞凋亡/细胞（Annexin、caspase、PI、线粒体膜电位、细胞表面死亡受体、钙黄绿素）
• 细胞周期分析及倍性
• 细胞摄取试验
• CFSE（细胞运输和增殖）
• 细胞内NO和超氧化物的形成
• 免疫组化染色（CD4，CD8等）
• 多参数免疫表型分析
• GFP和YFP表达，Treg细胞FOXP鉴定
• 转导作用
• 细胞表面标志物分析（HLA-A，B，C）
• 人骨髓间充质干细胞（干细胞）的表型分析
• 磷酸化组蛋白h2xa水平
• T细胞表型，细胞表面标志（CD4，CD8），颗粒酶B的分析
• 单核细胞和巨噬细胞吞噬活性
• 钙动员
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