实验
仪器：所有分析实验均在由Empower 3软件控制的ACQUITY UPC² 上进行。制备实验在由ChromScope软件控制的Investigator SFC系统上进行。

色谱柱：沃特世公司的ACQUITY UPC²  BEH和2-Ethyl Pyridine 3.0 x 100 mm，1.7μm色谱柱。CHIRALPAK AS-H 4.6 x 150 mm，5 μm，购自Chiral Tec hnologies公司（宾夕法尼亚州西切斯特）。

样品描述
样品购自Sigma Aldrich和1-Material公司。为了形成异构体，将样品置于控温箱内进行热应激，引发异构化反应。冷却至室温后，将样品溶于氯仿中，用于随后的分析操作。

结果与讨论
图2是未经处理以及经过热应激的Ir（Fppy）3 的UPC²/UV色谱图。色谱峰1与色谱峰2的质谱（未显示）相同，但紫外光谱（插图）明显不同，说明它们最有可能是面式异构体和经式异构体。标有“desfluoro”的峰出现的原因是Ir（Fppy）₃ 中的一个F原子丢失。但是，两张图谱的主要差异在于峰1与峰2之间的相对比例。加热时，1/2的峰比将会增大。其可能是由热异构化过程引起的，在异构化过程中，稳定性较差的经式异构体（峰2）转化成稳定性较高的面式异构体（峰1）。图2清楚地表明，Ir（Fppy）₃ 的同分异构体可轻易地通过使用ACQUITY UPC² 进行分离。

图2 使用ACQUIT Y UPC² 2-EP3x100mm，1.7μm色谱柱得到的Ir（Fppy ）₃ UPC²/UV色谱图。（A）在280℃下处理24 小时的样品；（B）在25℃下未经处理的样品。流速为1.5mL /min；背压为2175 psi；30%异丙醇辅助溶液等度洗脱；温度为40℃。峰标记后面的数据表示以峰面积表示的每个峰的相对百分比。

图3是使用非手性固定相和手性固定相得到的Flrpic UPC²/UV色谱图。在手性柱中，Flrpic裂分为两个峰，如图3B所示。图3B中的两个峰具有相同的质荷比（未示出）和紫外光谱（插图），说明这两个峰最有可能来源于同一对对映体。与均配物Ir（Fppy）₃ 不同的是，杂配物Flrpic由两种不同的配体构成。这种分子对称性反过来产生了光学异构。在实际应用中，例如三维显示，具有高度的发光不对称性是很有利的。因此，UPC² 提供了一种简单的测定手性荧光化合物对映比的方法，这对于使化学结构与发光对称性相互关联是很重要的。

图3 标准级Flrpic的UPC²/U V 色谱图。（A）使用一根ACQUITY UPC²  BEH 3x100mm，1.7μm色谱柱；流速为1.5mL/min，背压为1740psi，35%异丙醇等度洗脱，温度为40℃。（B）使用两根CHIRALPAKAS-H 4.6x150mm色谱柱（每根均为5μm）。流速为3mL/min，背压为2175psi，23%异丙醇共溶液等度洗脱；温度为50℃。

图4是在ACQUITY UPC²BEH色谱柱上得到的未经处理和经热应激的Flrpic UPC²/UV色谱图。对于经热应激的样品，会观察到一个多出的峰，如图4B所示。两个峰的质谱完全相同（结果未示出）。对紫外光谱更仔细地观察发现（如图5所示），图4B中的各个峰的紫外光谱并不相同。与图3B中所示的对映体不同，这些对映体的紫外光谱是相同的。图4B中的小峰的最大吸收波长λmax为245 nm，而主峰的最大吸收波长λmax为251nm。这些结果说明，经热应激的样品已经发生了异构化，生成了另一种同分异构体，这类似于升华过程中所观察到的一样^5,6。因为总分析时间短于5分钟，UPC² 能够实现在升华后对材料纯度的快速测定，并可作为设备制造之前的质量控制方法。

图4 在ACQUITY UPC² BEH3x100mm，1.7μm色谱柱上、等度洗脱（35%辅助溶剂）条件下得到的：（A）未经处理的Flrpic和（B）经热应激的Flrpic的UPC²/UV色谱图。流速为1.5 mL/min；背压为2175psi；35%异丙醇辅助溶液等度洗脱； 温度为40℃。