硝基咪唑类酶联免疫检测试剂盒使用说明

一、检测原理

本试剂盒是利用竞争ELISA方法，在酶标板微孔上预包被抗 硝基咪唑抗原。检测时，加入标准品或样品溶液，硝基咪唑抗体及酶标记物，包被抗原和加入样本中的硝基咪唑竞争性地与硝基咪唑抗体结合后，再与酶标记物形成抗原抗体复合物，用TMB底物显色；加入反应终止液，在450nm波长酶标仪下进行检测，样品中的硝基咪唑浓度与吸收光强度成反比。

二、检测范围

本试剂盒是应用ELISA技术研发的药物残留检测产品,与仪器分析技术比较，能经济、快速地检测出蜂蜜中的硝基咪唑类药物。

三、交叉反应率

与类似物的交叉反应率：

甲硝唑(MNZ) ………………………………………100%

二甲硝咪唑DMZ…………………………………… 168%

洛硝唑(RNZ) ………………………………………112%

异丙硝唑……………………………………………33%

四、试剂盒组成

酶标板1块，96孔/板

标准液6瓶（1ml/瓶）：

0 ppb、0.05ppb、0.2ppb、0.8ppb、3.2ppb、12.8ppb

抗体工作液 ………………………7ml

酶标记物 ……………………… 12ml

底物液A …………………………7ml

底物液B …………………………7ml

终止液   …………………………7ml

20X浓缩洗涤液  ………………40 ml

2X浓缩复溶液   ………………50 ml

说明书 ……………………………1份

样本处理步骤：

(A)蜂蜜（样本稀释倍数0.5）

（1）取3g蜂蜜，加3ml 0.1M 碳酸盐缓冲溶液振荡至蜂蜜全部溶解；

（2）加入9ml 二氯甲烷，振荡5分钟，室温4000转/分，离心5分钟；

（3）去除上层杂质，取下层有机相6ml至另一离心管中，加入2ml二氯甲烷，2ml 2M氢氧化钠溶液，室温4000转/分，离心5分钟；

（4）取4ml清澈下层有机相至干燥溶器中，50℃水浴氮气吹干；

（5）用0.5ml复溶工作液溶解干燥的残留物，再加入正己烷1ml混合30秒，室温3000转/分以上，离心5分钟；

（6）去除上层取下层50µl液体用于分析。