不好的内切酶常常被各种蛋白酶、非特异外切酶和核酸外切酶污染。使用被外切酶污染的内切酶切割DNA,则会在切割底物的同时破坏产物的末端(外切酶偷偷切掉1、2个bp,琼脂糖电泳却看不出来),让后续的连接、克隆和表达出现问题!
而NEB提供的内切酶大部分都经过重组改造,在最大程度上避免了外切酶污染的问题,让你的基因安全可靠!
好的内切酶 | 不好的内切酶 |
· 活性高 | ·活性不高 |
成功连接,克隆并表达 | 连接失败,克隆不成功,无法表达或产物不正确 |
质粒DNA |
酶切反应 |
好的内切酶切割 不好的内切酶切割 |
完整的DNA片段 连接 完整的DNA片段 少量的外切酶损坏DNA末端 不完整的DNA片段+1、2个dNTP 连接 |