国际生物安全柜标准-欧盟EN12469:2000和美国NSF49:20...（一）

国际生物安全柜标准-欧盟EN12469:2000和美国NSF49:2002的比较

作者：Lin Xiang Qian 翻译：Wu Xiao Feng 日期:2005-9-1

摘要

在2000年5月，欧洲标准化委员会(CEN)颁布了生物安全柜欧洲标准EN12469:2000，正式替代了德国DIN 12950、英国BS5726和法国NF X-44-201等欧盟成员国生物安全柜的标准，成为欧盟区域内生物安全柜的统一标准。

NSF49在上世纪70年代就已经出现，被公认为目前生物安全柜领域最完善的标准。在2002年，ANSI/NSF49正式获得了美国国家标准学会（American National Standard Institute, ANSI）的官方认可，成为美国生物安全柜的统一标准。

EN12469和NSF49是目前世界生物安全柜领域最重要的标准，在这篇文章中，我们会着重介绍和讨论两项标准之间的区别，以供业内人士参考。

1、安全柜型号的规定

EN12469对一级、二级和三级生物安全柜的分类、性能和检测有明确的规定：

一级生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样，不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。

二级生物安全柜是目前应用最为广泛的柜型，通过HEPA过滤器的洁净气流从安全柜顶部垂直吹下，通过工作区域，在到工作人员的呼吸区域前被俘获。气流在放空前将被过滤。所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护。

三级生物安全柜是为4级实验室生物安全等级而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱(Golve box)，试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验。

目前市面上大多数生物安全柜都是二级的，而一台“欧洲标准二级生物安全柜”和一台“美国标准二级生物安全柜”是不同的：最基本的方面来说，两种类型安全柜都可以提供对操作人员、试验品和工作环境的保护；工作原理也相同。最大的区别是EN12469只对“二级生物安全柜”有一个基本的定义，而NSF49将二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式等分为4个类型：A1型，A2型(原B3型),B1型和B2型：

A1型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.38m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。

A2型安全柜前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排除。

二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜。连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速度最小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。B1型70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区。B2型为100%全排型安全柜，无内部循环气流，可同时提供生物性和化学性的安全控制。

A1型和B1型二级生物安全柜目前在美国已经很少使用；B2二级生物安全柜在美国特定的生物研究领域有着广泛的使用，而在欧洲几乎没有使用。有趣的是，欧洲市场上符合EN12469的二级生物安全柜在结构要求方面基本等同于美国A2型生物安全柜（除了一些小的区别），而这两种类型的生物安全柜是目前世界上各类生物安全柜（无论一级、二级或三级）中最普遍使用的。

2、对安全柜性能和测试的规定

EN12469和NSF49都是以规范性能为基础的标准，换句话说，标准并不侧重安全柜结构设计，不是通过细节规格要求去规定生产商如何制作安全柜；相反的，生产商拥有很大的自由去设计自己的安全柜，只要可以符合性能测试标准。EN12469和NSF49的主要内容是规定各项测试的参数和合格标准（大约70%的内容），测试包括有人员、试验品和环境保护的微生物测试 、气流速度数据（进气流速率、进气流体积、下沉气流速率和均匀性测试 ）和气流烟雾测试测试等，下文将会着重介绍各项测试以及两大标准的区别。

3、物理性能测试和合格标准

EN12469和NSF49都详细规定了安全柜的各项测试方法和合格标准，两者的区别介绍如下：

a. 人员、试验品和环境保护的微生物挑战测试
在这个测试项目中，EN12469基本采用NSF49的测试方法，合格标准也基本相同。 但EN12469在人员保护测试中有一处明显的不同，被认为常规微生物挑战测试基础上的另一种物理测试方案(KI-Discus测试)。

KI-Discus测试被认为是欧洲标准EN12469优于NSF49的一项测试，因为KI-Discus测试是这个方面唯一可以当场验证安全柜污染控制性能的测试。不像针对常规人员保护的微生物挑战测试只可以提供Pass/Fail结果，KI-Discus测试可以测量直观的APF指数(Aperture Protection Factor)来鉴别安全柜的污染控制性能。EN12469规定安全柜的APF必须高过10,000，也就是安全柜中逃逸的微粒比例需要低于万分之一。

[在英国应用微生物学研究中心(CAMR UK)独立进行的多轮测试中，ESCO生物安全柜的APF指数平均值超过100,000，远远超过标准所规定的10,000。]