1、前言
20新世纪60时代至今，大家慢慢发觉多糖具备繁杂多种多样的微生物特异性和作用，如多糖有免疫调节作用可做为广谱免疫力硫化促进剂，做为药品能够治疗风湿病、漫性慢性乙型肝炎、癌证等；还具备抗感染药、抗放射线、抗凝血、降血脂、降血糖，推动核苷酸与蛋白的微生物生成等功效。菱，别称凌角、水菱角、风菱，为菱科菱属绿色植物乌菱TrapabicomisOsbeck的種子，据参考文献记述，其果核、果柄、果、茎及叶柄均可进药，有健胃消食止痢、防癌等功效；还可用以缓解胃溃疡症状、急性肠炎、食管癌、宫颈癌及宫颈癌等。
本科学研究初次从天然的菱角壳中获取分离出来出多糖，并对多糖的单糖构成开展了深进的科学研究，为深化开发设计和运用天然的凌角資源出示了科学论证。
2、试验部分
2.1 试品、实验试剂与仪器设备市面上的凌角往仁后，壳晾干，破碎预留。单糖及双糖标准物质(半乳糖、阿拉伯糖、木糖、鼠李糖、甘露糖、果糖、乳糖和蜜二糖)均购自ChemService，纯净度超过98％。常用化学药品除乙醇和酒精为色谱纯外，其他均为分析纯。UV-2501PC紫外线光谱分析仪(日本岛津企业)；NicoletMagna560傅里叶变换光谱分析仪(英国尼高力企业)；VarianUnityPlus600磁共振波谱仪(英国瓦里安企业)；HP6890和HP5973气象色谱仪-质谱分析联用仪(英国安捷伦公司)。
2.2 试验方式
(1)多糖化学物质的获取及提纯方式 称量800g清洗晾干的菱角壳，加微信好友1:1酒精-乙醚溶液，65℃水浴流回1～3h往脂；沉渣中放水，9O～100℃水浴获取4～6h，拆换净化水不断获取2～3次，合拼暗红色多糖萃取液，过虑，萃取。向萃取液加微信好友3／7倍容积的酒精，离心分离沉定，冻干得多糖粗品F1。往上清液里加人1.0倍容积的酒精，离心分离沉定，冻干得多糖粗品F2。以此方式 ，往上清液中依次加微信好友1.5和4.0倍容积酒精，各自获得多糖粗品F3和F4。。若立即向原多糖萃取液里加人4倍容积的无水乙醇，则获得混和多糖粗品F5。用Sevag法除往多糖粗品中的蛋白，H2O2法除往黑色素，分析72h后，萃取，冻干，即得多糖纯品；
(2)多糖的水解反应取多糖试品10mg于安瓶精华里加人3moL／L三氟乙酸2mL，密封性后在120℃控温中水解反应6h，用N2烘干三氟乙酸，加乙醇并烘干，水解反应物质加进去0.6mL0.05mol／LNaOH水溶液，加上5mgNaBH4，室内温度下反映8—10h，加少量甲酸溶解过多的NaBH4，至0造成才行。蒸干反映液，以酸碱性乙醇清洗反映物质，蒸干乙醇液，反复3—4次以除往硼酸根，最终加进去乙醇蒸干并且于烘干箱中105℃除净水份；
(3)乙酰化衍化法取水解反应得的单糖3mg，加进去0.5mL吡啶，1mL乙酸酐，加温2h，水冷却后加二甲苯2mL，用N2烘干，加进去氯仿，纯净水清洗，用N2烘干获得黄棕色物质。此乙酰化的单糖醇用CHC13稀释液后开展气象色谱仪-质谱分析；(4)三甲医院基硅烷化衍化法取水解反应得的单糖试品6mg，加吡啶0.6mL，六甲基四硅胺烷0.2mL，三甲基氯硅烷0.2mL，震荡，静放，取上清液开展气象色谱仪-质谱分析。
2.3 GC-MS剖析标准HP-5方解石毛细管色谱柱(英国安捷伦公司)，(50m×0.22mmi。d。，0.25μm)；EI源，电子器件动能70eV，含量扫描仪范畴33—550，进样口溫度260℃，插口溫度270℃，载气氦气水流量1.2mL／min，分离比20：1，程序升温：100℃→1O℃／min150℃→15℃/min260℃(40min).
3、結果与探讨
3.1 菱角壳提取液中多糖的评定剖析Molisch试验：盐酸和多糖水溶液分成双层，层与层中间有蓝紫色环出現。表明提取液确含糖量。混和多糖F5纯品的FT-IR谱图。谱图中好几处可看到多糖的特点峰，如：3435/cm，2924/cm的消化吸收峰各自为O—H，C—H的伸缩式震动峰，1193/cm，1037/cm处的消化吸收峰是多糖中C—O，C—O—C伸缩式震动和C—OH的弯折震动特点峰，在1000—700/cm的消化吸收峰则是α-和β-吡喃单糖产生的特点。
混和多糖F5纯品的HNMR谱图。谱图中δ3.5—δ5.5中间看得见好几个糖质子的没有响应数据信号峰，在其中δ4.605、δ4.7和δ4.9223个峰是β-吡喃环带的质子数据信号，而δ5.238、δ5.348、δ5.446、δ5.465和δ5.515则将会来源于于α-吡喃环带的质子，不难看出，此多糖将会是由多种多样单糖构成。
3.2 凌角壳多糖中单糖构成的明确试品F1一F4水解反应物质的乙酰化化合物经气象色谱仪-质谱分析，根据与规范色谱图对比较为和质谱分析残片分析，明确了其单糖构成及摩尔比。统计数据说明，4种多糖各自由不一样摩尔比的几类单糖(如阿拉伯糖、鼠李糖、木糖、甘露糖、半乳糖、果糖)和二糖(乳糖、蜜二糖)构成，在其中多糖F2一F4的单糖构成同样，仅仅摩尔比略有不同；而F1则由5种单糖和2种二糖构成。果糖，半乳糖和甘露糖在4种多糖中占的占比很大，是凌角多糖的关键成份。
混和多糖试品F5的甲基硅烷化化合物的GC-MS，经残片剖析并运用规范质谱分析NIST库开展查找，l1个色谱分析峰被确认为单糖的甲基硅烷化化合物。因为在衍化化全过程中α型和β型吡喃和呋喃异构体的先天性，相同单糖能够先天性几类化合物。因而，只验出5种单糖，主要包括二种戊糖(阿拉伯糖和木糖)，3种己糖(甘露糖，半乳糖和果糖)。从峰总面积百分数统计数据可以看得出，果糖、半乳糖、木糖和甘露糖在该混和多糖中常占的占比很大，是凌角多糖的关键成份，这与乙酰化剖析的結果基本相同。
文章链接：仪器设备网 https://www.instrumentsinfo.com/technology/show-1274.html
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