试剂、试剂盒 甜菜碱dNTP 溶液二甲基亚砜四甲基砜Taq 酶和酶缓冲引物
仪器、耗材 PCR 仪
实验步骤
一、材料
1. 试剂
甜菜碱（Sigma 公司）
dNTP 溶液（含四种 dNTP, 每种 25 mmol/L)
二甲基亚砜（DMSO)(Sigma 公司）
四甲基砜（Sigma 公司）
2. 酶和酶缓冲液
Taq 酶
Taq 酶缓冲液（Taq 酶制造商提供）
3. 核酸和寡核苷酸
人类基因组 DNA，每个反应中 20ng，
hRF3(hGSPTl) 引物：hRF3f CCGC/CTCT/GTCG/TCGT/CGC
hRF3r CCGC/GCTG/AGGT/TCTC/CC
Klotho 外显子 la 引物：klolaf CTCG/CAGG/TAAT/TATT/GCCAG
klolar GATG/GACG/CACC/CTTG
Klotho 外显子 lc 引物：klolcf GTGC/AGCC/CGTG/GTCAC
klolcr GACT/CAGT/TCCC/ACAC/TTC
4. 设备
PCR 仪
5. 其他
琼脂糖凝肢电泳所需设备和试剂
二、方法
1. 在灭菌的 0.2 ml 的 PCR 管中加入下列试剂。
基因组 DNA 20ng
引物（每种） 15pmol
Taq 酶 0.5U
10 x buffer 2.5ul
dNTP 溶液（含四种 dNTP) 250umol/L
加 H20 到 25ul
根据处理条件的不同，分别包含 DMSO(5%)、甜菜碱（lmol/L)、甜菜碱（2mol/L)、甜菜碱（lmol/L) 和 DMS0(5%)、甜菜碱（2mol/L) 和 DMS0(5%)、四甲基砜(0.4mol/L)，对照不加任何其他试剂。
2. 采用下列程序 A 或 B 运行 30 个循环。
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