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光合速率测定最经典的方法之一——改良半叶法

2020.8.13
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coconut

天道酬勤

  测定光合速率的方法有多种,特点是科技的进步,测定的方法又增加了,如传感器测定光合速率。但经典的测定方法可能就是半叶法和黑白瓶法。测定光合速率的方法汇总和黑白瓶法以前已经推送过,今天推送的是半叶法,半叶法也是大学教材中的经典实验。

  问题:半叶法的实验原理和实验步骤是怎么样的?注意哪些事项?

  实验原理和材料

  1.实验原理:

  改良半叶法系将植物对称叶片的一部分遮光或取下置于暗处,另一部分则留在光下进行光合作用,过一定时间后,在这两部分叶片的对应部位取同等面积,分别烘干称重。

  因为对称叶片的两对应部位的等面积的干重,开始时被视为相等,照光后叶片重量超过暗中的叶重,超过部分即为光合作用产物的产量,并通过一定的计算可得到光合作用强度。乘以系数后还可计算出CO2的同化量。

  2.实验仪器:

  分析天平,烘箱,剪刀,称量皿,刀片,金属模板,纱布,锡纸

  3.实验试剂:

  三氯乙酸

  4.实验材料:

  田间有代表性的植物叶片

  实验步骤

  1.选择测定样品

  在田间选定有代表性植株叶片(如叶片在植株上的部位、叶龄、受光条件等)20张,用小纸牌编号。

  2.叶子基部处理

  为了不使选定叶片中光合作用产物往外运,而影响测定结果的准确性,可采用下列方法进行处理:

  (1)可将叶子输导系统的韧皮部破坏。如棉花等双子叶植物的叶片,可用刀片将叶柄的外皮环割约0.5cm宽。

  (2)如小麦、水稻等单子叶植物,由于韧皮部和木质部难以分开处理,可用刚在开水中浸过的纱布或棉花做成的夹子,将叶子基部烫伤一小段即可(一般用90℃以上的开水烫20s)。

  (3)由于棉花叶柄木质化程度低,叶柄易被折断。用开水烫,又难以掌握烫伤的程度,往往不是烫得不够便是烫得过重而叶片下垂,改变了叶片的角度。

  因此可改用化学方法来环割,选用适当浓度的三氯乙酸,点涂叶柄以阻止光合产物的输出。

  三氯乙酸是一种强烈的蛋白质沉淀剂,渗入叶柄后可将筛管生活细胞杀死,而起到阻止有机养料运输的作用。

  三氯乙酸的浓度,视叶柄的幼嫩程度而异。以能明显灼伤叶柄,而又不影响水分供应,不改变叶片角度为宜。一般使用5%三氯乙酸。

  为了使烫后或环割等处理后的叶片不致下垂,影响叶片的自然生长角度,可用锡纸或塑料管包围之。使叶片保持原来着生角度。

  3.剪取样品

  叶基部处理完毕后,即可剪取样品,记录时间,开始光合作用测定。一般按编号次序分别剪下对称叶片的一半(主脉不剪下),按编号顺序夹于湿润的纱布中,贮于暗处。

  过4-5h后,再依次剪下另外半叶,同样按编号夹于湿润纱布中,两次剪叶的速度应尽量保持一致,使各叶片经历相等的照光时数。

  4.称重比较

  将各同号叶片之两半对应部位叠在一起,在无粗叶脉处放上已知面积(如棉花可用1.5×2cm)的金属模板,用刀片沿边切下两个叶块,分别置于照光及暗中的两个称量皿中,80-90℃下烘至恒重(约5h),在分析天平上称重比较。


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