实验方法原理
采用一种具有惰性的多聚化合物(葡聚糖)为骨架,将特异性抗体和 HRP 结合在一起,形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物,该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时,只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂,孵育 30~60 min 即可完成。勿需再加酶标记第二抗体。
实验材料 石蜡切片
试剂、试剂盒 蛋白酶PBS蒸馏水H2O2Dako EPOS HRP 试剂DAB树胶二甲苯乙醇
仪器、耗材 滴管玻片
实验步骤
1. 石蜡切片常规脱蜡至水,PBS 洗 3 min×3 次。
2. 蛋白酶消化或抗原修复(AR),PBS 洗 3 min×3 次。
3. 0.3% 过氧过氢(H2O2)处理 5 min。
4. 蒸馏水洗,置于 PBS 中洗 5 min。
5. 加入相应的 Dako EPOS/HRP 试剂,室温孵育 30~60 min。
6. PBS 洗 3 min×3 次。
7. 0.04% DAB- 0.03% H2O2 显色 8~12 min。
8. 水洗,复染,常规树胶封片。