纤维素的高碘酸活化实验

实验方法原理

实验材料 纤维素粉

试剂、试剂盒 NaHCO3-NaIO4碳酸钠缓冲液。NaBH4 溶液乙酸钠-乙酸PBS

实验步骤

实验所需「试剂」具体见「其他」

将 2 g 纤维素悬浮于 40 ml 0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4 中，黑暗条件下放置 2 h，然后在玻璃料上用 0.1 mol/L pH 9.0 碳酸钠缓冲液冲洗。在 40 ml 缓冲液中加入待固定的蛋白质（约 1 mg/ml），室温振荡过夜。为去除希夫碱，在溶液中加入 2 ml NaBH4，室温振荡 30 min。之后再次加入 2 ml NaBH4，室温振荡 30 min。用 0.1 mol/L pH 4.0 乙酸盐-乙酸、PBS 和 0.05％ 的吐温 20 冲洗固体材料。

注意事项

其他

试剂：

0.1 mol/L NaHCO3-0.06 mol/L NaIO4（NaHCO3，Mr＝84.0；NaIO4，Mr＝213.9；8.4 g NaHCO3 ，12.8 g NaHCO3 溶于 100 ml H2O）

0.1 mol/L 碳酸钠缓冲液（NaHCO3－Na2C03），pH 9.0

NaBH4 溶液（0.1 g NaBH4 溶于 10 ml 0.1 mol/L NaOH，现配）

0.1 mol/L 乙酸钠-乙酸，pH 4.0

PBS（磷酸缓冲液：10 mmol/L 磷酸二氢钾-钠，pH 7.2，0.8％ NaCl，0.02％ KCl）

0.05％ 吐温 20 溶于 PBS