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吞噬功能实验

2020.8.17
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验材料 中性粒细胞

试剂、试剂盒 NBT盐水PBS硝基蓝四氮唑肝素甲醇沙黄水

仪器、耗材 试管毛细滴管玻片培养箱显微镜

实验步骤

一、试管法

 

肝素抗凝血0.1 ml 滴于小试管底部,再加入等量NBT应用液

37℃,30分钟(中间摇动一次),再置室温15分钟

摇匀,用毛细管取一滴放于玻片一端,做血涂片

立即用电吹风吹干,甲醇溶液固定1分钟,10 g/L 沙黄水溶液染色5分钟

PBS冲洗、自然干燥、油镜检测

 

二、微量法

 

取硅油处理的1 mm×75 mm 的毛细管取末梢血至30 mm 处

立即吹入硅油处理的凹玻片中,与1/30量的0.05%肝素溶液混合

加等量的1 g/L NBT,轻轻摇动混合,湿盒内,37℃,室温15分钟

用毛细管吸去表层上清液,用硅油处理的毛细管吹数次混匀

吸出少许制成血片,空气干燥,沙黄水溶液染色,油镜观察

 

三、结果


1.  血片中有10%以上的中性粒细胞的胞质中有蓝紫或蓝黑颗粒沉着,其沉着颗粒形状大小不一,有的呈大块状,有的呈点状或放射状。


注意事项

NBT配制一定要完全溶解,滤液要呈透明的淡黄色,储存于棕色瓶中,NBT应用液应于用前配制。血涂片要求推出尾部,不可过厚或过薄。血液与NBT要充分混合,保温时间不能过长。


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