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ELISA试剂盒的洗版新方法

2020.8.31
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

七月底,浙江大学张同学由学校实验室的其他同学介绍与我司取得联系。并订购了人MDA、GSH-PX、SOD、TAOC elisa试剂盒。星期一老师做了人GSH-PX elisa实验。介绍自己在洗板操作过程遇到棘手问题,麻烦我司技术给她提供解决处理方法及建议。主要问题如下:

问题一:说明书上说洗板时要把孔里的水甩干,可我做的时候,无论我怎么拍,孔底还是有残留液体,请问这对试验有没有影响?或着有没有别的什么好的办法可以解决这个问题?
答:有一定的影响.尤其二抗反应后洗涤不好,会出现非特异.ELISA试验中洗涤是关键.尽可能甩干,而且尽量少拍,不一定每次都很干,但是*后一次洗涤要尽量干.洗涤中另一个值得注意的是尽量不要出气泡. 如果有条件的话,可用洗板机。

问题二:什么才叫封闭好了呢?有没有什么标准?
答:一般用1%BSA,150μl,37度,2h,如果还有非特异反应的话,可能有其他原因,比如加样时溅到了壁上或有气泡,洗涤不充分,二抗浓度过高,封闭物不合适以及反应条件是否得当等。

问题三:1%bsa,你是用什么稀释的,我用过pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀释,结果封闭的效果都不怎么明显,与不封闭差不多.
答:1%BSA用PBS稀释就可以了。还有就是要注意你的操作,背景高不一定是封闭的问题。

在我司技术的指导下,张老师相继完成了人MDA、SOD、TAOC 三个ELISA实验。并且实验取得预期理想结果。张老师对我司的产品跟服务表示感谢。并表示后续将继续与我司合作且将我司介绍给其他同学。在此,我司对张老师也表示感谢,承诺将一直为客户提供*优质的试剂盒跟服务!

ELISA法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。不仅适用于临床标本的检查,而且由于一天之内可以检查几百甚至上千份标本,因此,也适合于血清流行病学调查。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,elisa试剂盒可概括四个方面:
1、免疫酶染色各种细胞内成份的定位。
2、研究抗酶抗体的合成。
3、显现微量的免疫沉淀反应。
4、定量检测体液中抗原或抗体成份。

ELISA试剂盒洗板方法有以下两点
1. 手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。
2. 自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等

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