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磷酸盐缓冲液的配制方法

2020.8.31
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

磷酸盐缓冲液(PhosphateBufferedSaline,简称PBS)的是常用于生物学研究的一个缓冲溶液。PBS可以为三种溶液的英文缩写,分别是磷酸盐缓冲溶液(phosphatebufferedsolution)、磷酸盐缓冲盐水(phosphatebufferedsaline)及磷酸盐缓冲钠(phosphatebufferedsodium),其配制方法不同,pH值不同,发挥的生物学作用亦不完全相同。

磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法:

称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,*后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是,通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na离子或K离子的浓度,Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。 

PH7.67.47.27.0  

H2O1000100010001000  

NaCl8.58.58.58.5  

Na2HPO42.22.22.22.2  

NaH2PO40.10.20.30.4  

根据经验来看,新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间,可是在温度的影响下,尤其在夏天,其电离常数发生了改变,在经过昼夜的时间后,PH值会明显改变。所以做实验的同学可要注意了,PH值可能会影响实验结果,甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气,要加强实验条件控制问题。每次使用前用试纸测一下过夜了的PBS,如果发生偏酸或偏碱,注意重新换新液。


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