在我们使用96孔板的实验测定时候，常发现有“边缘效应”，也就是外周孔显色较中心孔深。经研究证实在温育中的热力学梯度可能是根本原因之所。聚苯乙烯本身为不良热导体，在实验室的常规ELISA测定中，将板从室温（通常在25℃左右）置于37℃温箱，板也升温时，在外周孔与中心孔之间可能存在一热力学梯度。因此使用水浴或在将反应溶液加入至板孔中时，将板和溶液均加热至温育温度（如37℃），就可以很容易地排除“边缘效应"，并且可提高测定的重复性。
给您的实验建议：
加样不可太快，要避免加在孔壁上部，不可溅出和产生气泡。太快的话无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区，易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。所以，有时候一份标本用相同的试剂盒这次测定为阳性，下次测定为阴性，往往就是上述加样及试剂的错误所致。
朋友们在需要使用elisa试剂盒时一定要根据自己的实验需要购买专用提取试剂盒，如果不是专用试剂盒，或许能提出RNA，但不能确保其质量以及完整性。
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