因elisa试剂盒操作步骤复杂，影响反应因素较多，在定量测定中，每批测试均须用一系列不同浓度的参考标准品在相同的条件下制作标准曲线。因有不少朋友们在实验中都遇到了曲线的问题，昨日我公司杨经理与实验的专业技术人员为其曲线问题找原因。
一 OD值不正常的可能原因是：
1、试剂盒未回温，试剂盒回温到25℃；
2、温度控制不好，控制正确温度；
3、孵育时间不准确，控制孵育时间；
4、洗涤时冲击力太大、浸泡时间过长、洗涤次数增 加，洗涤4-5次，每孔250ul，然后拍干；
5、阳光直射，对着风直接吹，避风避；
6、酶标仪的波长错误，酶标仪的波长450nm；
7、抗体的稀释错误，正确的稀释抗体；
8、水质问题，用娃哈哈矿泉水代替。
二 白板的可能原因是：
1、洗涤液配制错误，正确的配制洗涤液；
2、少加液体（错加液体），正确的步骤加液体。
三 无梯度可能原因是：
1、标准品也污染，换标准品点板；
2、OD值不正常，控制温度时间在做一次；
3、人为点板，不要点板。
四 线性不好可能原因是：OD值不正常，控制温度时间在做一次。
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