问 题 |
可能原因 |
建议解决方法 |
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推荐电压条件下电泳时间过长 |
电泳缓冲液过稀 |
配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液 |
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推荐电压条件下电流过高，热量过大 |
电泳缓冲液过稀 |
配制新鲜缓冲液，使用1X稀释液 |
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推荐电压条件下电流过低或无电流 |
接触不良 |
在电泳前移除胶盒底部的封条；确认缓冲液没过加样孔；检查buffer core上导线连接 |
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蛋白带型条状（streak） |
上样过量 样品中盐浓度过高 |
降低蛋白上样量通过透析或凝胶过滤降低样品中的盐浓度 |
| 样品沉淀 | 加大样品中 SDS的浓度 | |
| 样品中的污染，如脂类或DNA 复合物 | 离心或过滤样品以除去特定污染 | |
| 制胶不佳 | 确保灌胶均匀，一次完成 | |
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条带模糊 |
蛋白样品部分变性 | 完全变性蛋白 |
| 蛋白样品部分还原 | 确保加入足够量的 DTT或β巯基乙醇。 | |
| 电泳时间过长 | 观察前面的指示剂染料，掌握恰当的电泳时间。 | |
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哑铃形条带或 “微笑”条带 |
上样体积过大导致不完全堆积 | 使用恰当的上样体积，如果样品过稀，使用 超滤浓缩。 |
| 电泳过程中电场不均匀 | 如果蛋白浓度已知，上样时确保对称。 | |
| 分离胶表面不平 | 在制胶时使分离胶表面水平。 | |
| 凝胶过期 | 在指定的失效期前使用凝胶。 |
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