具体操作步骤如一下:
（1）先用低倍物镜找到标本后，换用高倍物镜观察，并将标本移至视野中心，将光阑放在zui大处，把镜筒提升约1.5厘米（或载物台下降1.5厘米），使物镜转离光轴。
（2）取下标本片，在聚光镜上端透镜平面上滴1、2滴香柏油，然后将标本片放回原位上，使载玻片下面与香柏油紧密接触，防止油中出现气饱。但通常的操作中，可省去这一步骤。
（3）在盖玻片上面或涂片标本所要求观察的部位上面滴1滴香柏油，把油镜转换到光轴上，特别小心地调节粗调焦螺旋，使镜头慢慢地下降，仔细观察油镜前端与标本之间的距离，当油镜的前端开始触及油滴时即停止下降。这一操作过程须十分小心，要防止油镜头压碎标本片和损坏油镜事故的发生。
（4）用左眼从目镜观察，用右手调节微调焦螺旋，使镜头慢慢调焦到正确的工作距离至看清楚标本物象。请注意:粗、微调焦螺旋不要搞错，盖玻片要薄，太厚时就不能聚焦，否则易压碎标本片和损坏镜头。
（5）调节光阑大小，使聚光镜的数值孔径与油镜配合以获得清晰的图象。’
（6）观察完毕，及时做好清洁工作。先使油镜升至和标本相距1.5厘米处，将油镜转离光轴，用干的擦镜纸轻轻地吸掉油镜头上的油，再用浸湿二甲苯的擦镜纸擦拭两次，zui后用
干净的擦镜纸再轻拭2、3次。聚光镜上的油滴用同样方法拭净。标本片上的香柏油可用拉纸法揩净，即用一小张擦镜纸盖在标本片的油滴上淤然后在纸上滴一些二甲苯，趁湿将纸往外拉，这样连续作3、4次，既可擦干净又不损坏涂片标本。使用油镜的注意事项：
（1）暂时中断油镜使用时，应将镜筒上升，使物镜转离光轴，以防镜筒下滑压坏标本片、损坏聚光镜和油镜的事故。
（2）使用完毕，及时将香柏油清洗掉，因香柏油在空气中容易粘尘，粘尘后再擦洗时可能磨损透镜。此外，香柏油在空气中风干后不易擦净，日久对镜头的胶合处有腐蚀、积尘和
发生霉变、灰雾等危害，所以必须及时、彻底擦净。
（3）使用油镜时，一般不进行同高调焦操作，因为同高调焦只适用于每台显微镜的原配物镜，如果标本片厚度太厚，进行同高调焦时，转换油镜可能会碰到玻片。
除了香柏油作油浸介质外，还可用水作介质，适用于观察水中的活体标本，操作方法基本同上。
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