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转录因子活性ELISA

2020.9.14
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

转录因子活性ELISA是建立在ELISA基础上的高灵敏度的检测方法,比EMSA的灵敏度高l0倍,在5h内就能完成。不涉及放射性和凝胶电泳,安全简便,而且这种微孔板的形式能同时检测1—96个样品。ArrayStarTM转录因子活性ELISA试剂盒可以快速、灵敏地检测细胞核提取物中转录因子的DNA结合活性。试剂盒采用96微孔板的形式,标记探针是生物素标记的双链寡核甘酸片断,含有转录因子的特异性DNA结合序列。

当标记探针与细胞核抽提物一起孵育时,核抽提物中有活性的转录因子与探针特异性结合形成转录因子/探针复合物。随后转录因子/探针复合物与链亲和素包被的微孔板孵育,转录因子/探针复合物通过与微孔板上链亲和素结合,被固定在微孔板上。

洗去未结合物,加入特异性一抗,然后加入HRP标记的二抗及底物,HRP催化底物发生颜色改变。

转录因子活性ELISA检测方法也是利用转录因子的DNA结合功能,但与传统方法不同的是,它是利用抗体进行检测,不需要使用放射性和电泳,根据颜色的变化,就能够安全地检测特定的转录因子活性改变。

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