（2）饲养细胞：在组织培养中，单个或少数分散的细胞不易生长繁殖，若加入其它活细胞，则可促进这些细胞生长繁殖，所加入的这种细胞数被称为饲养细胞。在制备McAb的过程中，许多环节　需要加饲养细胞，如在杂交瘤细胞筛选、克隆化和扩大培养过程中，加入饲养细胞是十分必要的。常用的饲养细胞有：小鼠腹腔巨噬细胞（较为常用）、小鼠脾脏细胞或胸腺细胞。也有人用小鼠成纤维细胞系3T3经放射线照射后作为饲养细胞。饲养细胞的量为一般为2×104或105细胞/孔。
 
　　2．细胞融合的步骤
 
　　（1）制备饲养细胞层：一般选用小鼠腹腔巨噬细胞。
 
　　与免疫小鼠相同品系的小鼠，常用BALB/C小鼠，6～10周
 
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　　拉颈 处死，浸泡在75%酒精内，3～5min
 
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　　用无菌剪刀剪开皮肤，暴露腹膜
 
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　　用无菌注射器注入5～6ml预冷的培养液（严禁刺破肠管）
 
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　　反复冲洗，吸出冲洗液
 
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　　冲洗液放入10ml离心管，1200rpm/分离5～6min
 
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　　用20%小牛血清（NCS）或胎牛血清（FCS）的培养液混悬，调整细胞数至1×105/ml
 
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　　加入96孔板，100μl/孔
 
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　　放入37。c CO2孵箱培养
 
　　（2）制备免疫脾细胞
 
　　最后一次加强免疫3天后小鼠拉颈处死
 
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　　无菌取脾脏，培养液洗 一次
 
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　　脾脏研碎，过不锈钢筛网
 
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　　离心，细胞用培养液洗2次
 
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　　计数
 
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　　取108脾淋巴细胞悬液备用
 
　　（3）制备骨髓瘤细胞
 
　　取对数生长骨髓瘤细胞离心
 
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　　用无血清培养液洗2次
 
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　　计数，取得×107细胞备用