（一）原理
IL-8对中性粒细胞具有激活和趋化作用，通过检测中性粒细胞的迁移距离可以确定IL-8的生物学活性，即对中性粒细胞的趋化活性。
（二）材料
（1）6%右旋糖酐生理盐水溶液。
（2）淋巴细胞分层液比重为1.077+（-）0.001。
（3）2%琼脂糖：称取2g琼脂糖，加入到100ml蒸馏水中，煮沸溶解。
（4）0.1%白明胶Hank’s液。
（5）DMEM培养液（2×浓缩），内含20%FCS和0.75mg/mlNa2CO3溶液。
（6）甲醇溶液、Wright-Giemsa染液。
（7）洁净载玻片。
（8）打孔器，直径为3mm。
（三）方法
（1）IL-8的诱生
①常规分离PBMC，洗涤后，调细胞浓度为5×106/ml。
②将细胞接种于24孔细胞培养板，每孔0.5ml。
③加诱生剂LPS（20ug/ml），每孔0.5ml，37度，5% CO2孵育48h。
④ 离心收集细胞培养上清液，用HCl溶液调为酸性（PH4.0），经SephadxG-75柱分离，收集活性组分即为待测的IL-8粗品。
（2）IL-8的生物活性检测
①琼脂板的制备；取溶化后50度左右保温的2%琼脂糖与等体积50度水浴预温的DMEM培养液（2×浓缩），混合，取3ml加到洁净的载玻片上，铺成薄层，室温凝固后，放4度，进一步凝固30～60分钟，红打孔器打孔。
②中性粒细胞制备：常规分离人外周血中性粒细胞。
③加样：取10ul中性粒细胞悬液加入琼脂板各组中心孔，分别取10ul待检样品及阳性对照品加入样品孔，取10ulDMEM培养液加入对照孔；将玻片置于湿盒内，37度温育2小时。
④染色：用甲醇溶液固定30分钟，用瑞氏染液染片并干燥。
⑤检测：显微镜下分别测量细胞从中心孔向样品孔游走的距离（趋化游走距离）及向阳性对照孔的游走距离（自发游走距离），趋化活性以趋化指数表示。
趋化指数=趋化游走距离/自发游走距离
（四）关键点
为确认待检样品中IL-8的特异性趋化效应，最好同时比较抗IL-8抗体与待测样品作用后的趋化结果。
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