一、概要

　　三聚氰胺是一种低毒、无味的纯白色单斜棱晶体，形似蛋白粉，属于三嗪类含氮杂环有机化合物，广泛应用于塑料、染料、化肥的生产和纺织行业。由于三聚氰胺分子含氮量很高，只要添加到食品中就可在检测中造成蛋白质含量较高的假象。目前在饲料、牛奶、奶粉、饼干、奶糖等相关产品均发现有三聚氰胺残留现象。动物实验结果表明，三聚氰胺的摄入可能会导致繁殖障碍、膀胱炎、慢性肾炎、肾结石、甚至膀胱癌。现有的检测三聚氰胺方法如液相色谱-质谱联用法、质谱电喷射离子技术其样品前处理复杂、所需仪器昂贵、操作复杂、耗费时间。而使用三聚氰胺ELISA试剂盒能够既快速又准确的分析样品中三聚氰胺残留。

　　三聚氰胺检测试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，操作时间短于45min，能最大限度地减少操作误差和工作强度。

　　二、试验原理

　　三聚氰胺检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被三聚氰胺抗原，样本残留的三聚氰胺和微孔条上预包被的抗原竞争抗三聚氰胺抗体，同时三聚氰胺抗体与酶标二抗相结合，加入TMB底物显色，样本吸光值与其残留物三聚氰胺成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中三聚氰胺的含量。

　　适用范围:

　　三聚氰胺检测试剂盒可定性、定量检测牛奶、奶粉、饲料、动物组织和鸡蛋等样本中三聚氰胺的残留量。

　　交叉反应率:

　　三聚氰胺………………………………………………100%

　　三、检测步骤：

　　1、将所需试剂从冷藏环境中取出，置于室温（20～25℃）平衡30min以上，注意每种液体试剂使用前均须摇匀。

　　2、取出需要数量的微孔板，将不用的微孔放入自封袋，保存于2～8℃。

　　3、洗涤工作液在使用前也需回温。

　　4、编号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。

　　5、加标准品/样本：加标准品/样本50l/孔到对应的微孔中，再加入酶标物50l/孔，再加入抗试剂50l/孔轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境中反应30min。

　　6、洗板：小心揭开盖板膜，将孔内液体甩干，用洗涤工作液300l/孔，充分洗涤5次，每次间隔30s，用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破）。

　　7、显色：加入底物液A液50l/孔，再加底物液B液50l/孔，轻轻振荡混匀，用盖板膜盖板后置室温25℃避光环境反应15min。

　　8、测定：加入终止液50l/孔，轻轻振荡混匀，设定酶标仪于450nm处（建议用双波长450/630nm检测，请在5min内读完数据），测定每孔OD值。(若无酶标仪，则不加终止液用目测法可进行判定)。

　　四、检测方法灵敏度、准确度、精密度

　　试剂盒灵敏度：10ppb

　　样本最低检测限：

　　牛奶………………………………………………100ppb

　　鸡蛋………………………………………………100ppb

　　组织………………………………………………100ppb

　　奶粉…………………………………………… 500ppb

　　饲料…………………………………………… 500ppb

　　回收率：

　　牛奶………………………………………………… 110±10%

　　鸡蛋………………………………………………… 90±10%

　　组织………………………………………………… 80±10%

　　奶粉………………………………………………… 80±10%

　　饲料………………………………………………… 80±10%

　　精密度：

　　试剂盒的变异系数均小于10%

　　五、贮藏条件及保存期

　　贮藏条件：保存试剂盒于2~8℃。

　　保存期：该产品有效期为12个月。

　　编辑：songjiajie2010