目前，世界上使用的农药已超过800种，其中很多化合物在饮用水和食品中法定允许量即最大残留 限要求得到控制。对于这种目标物分析，迫切需要能够进行同时多残留组分的分析方法，这样可以大大 降低工作量。但是，很多农药用GC-MS分析很困难或几乎不能分析，但是却可以用LC-MS/MS多残留组分 分析方法进行鉴定和定量。MRM（多反应监测）是优先选择的扫描模式，然而，对每个农药而言，单一 MRM离子对并不能够百分之百确证该农药的存在，需要采用第二个MRM离子对来验证分析结果。绝大多 数样品，如水果、蔬菜等，含有需要监测的农药种类不超过10%，因此，一部分确证离子对并不需要，因 为有部分农药并不存在，先前的采集时间浪费掉了。所以，我们研究了一种采用单一MRM离子对鉴定和 定量农药的方法。

　　本研究利用新型串联四极杆质谱仪 -四极杆 -线性离子阱融合质谱仪3200 QTRAP®的MRM扫描触 发“增强子离子扫描EPI”的“信息关联扫描information-dependent acquisition (IDA)”技术确证所检测的化 合物。其结果是MS/MS系统的采集时间主要用于大多数目标化合物的快速筛选上，只有当检测到某个 农药存在时才自动进行确证测定。确证测定提供了碰撞碎片离子的全谱，与农药谱库中的图谱进行检

　　索、比较。

　　样品制备 样品制备如图1所示

　　色谱分离条件 Agilent 1100液相色谱系统：二元泵系统、自动进样器、柱温箱。 色谱柱：Phenomenex Aqua，5 µm，18 Å，C18，50 mm×2 mm。 流动相：A相—水 + 5 mmol/L甲酸铵；B相—甲醇 + 5 mmol/L甲酸铵。 步骤 时间 (min) 流速(µL/min) A (%) B (%) 0 0.00 200 80 20 1 11.00 200 10 90 2 23.00 200 10 90 柱温箱温度：20 ℃；进样体积：20 µL。

　　色谱分离条件 Agilent 1100 系统：二元泵系统、自动进样器、柱温箱。 色谱柱：Phenomenex Aqua，5 µm，18 Å，C18，50 mm×2 mm。 流动相：A相—水 + 5 mmol/L甲酸铵；B相—甲醇 + 5 mmol/L甲酸铵。 步骤 时间 (min) 流速(µL/min) A (%) B (%) 0 0.00 200 80 20 1 11.00 200 10 90 2 23.00 200 10 90 柱温箱温度：20 ℃；进样体积：20 µL。

　　MS/MS检测 3200 QTRAP® LC-MS/MS系统，TurboIonSpray®离子源（450 ℃），正离子方式模式。采用IDA关联扫 描包含297组MRM离子对（驻留时间为5 ms，停留时间为1 ms，碰撞能量CE分别为+20、+35、+50 eV） 的筛选检测扫描和在20、35、50 eV碰撞能下3个EPI扫描，扫描速度4000 amu/s，填充时间（fill time）为 100 ms。采用动态背景减法（DynamicBackgroundSubtraction，SBS）对筛选检测扫描中的峰进行鉴定，然 后在包含有碰撞能量CE分别为+20、+35、+50 eV获得的质谱图库中检索、鉴定。

　　结果 作为特色，串联四极杆的MRM扫描由于其具有高灵敏度和高选择性是定量测定的shou选。要成功地进 行多目标农药化合物的检测，必须要有一个快速碰撞室。技术LINAC® 线性加速碰撞室用在AB公 司所有的串联四极杆质谱仪和四极杆-线性离子阱融合质谱仪上，它采用一个轴向电场加速碰撞后的碎片 离子，大大缩短了离子的驻留时间，而信号强度基本不受影响。以前的研究发现，用API 2000™ LC-MS/MS 检测100种农药时25 ms的离子驻留时间绰绰有余，如今，3200 QTRAP® LC-MS/MS的灵敏度大大提高，因 此可以极大地缩短每个MRM离子对的离子驻留时间，从而增加检测化合物的数量。图2显示了用5 ms驻留 时间检测300种农药(100 ng/mL)的MRM色谱图。图3显示了1 ng/mL 12种农药的MRM灵敏度数据，可用于水

　　加水至 5 g或10 g干燥或含水样品中总体积至10 mL

　　加入20 mL甲醇均化，如需要可过滤或离心

　　加入氯化钠溶液浸泡，Chem Elut

　　二氯甲烷提取，蒸发至干

　　甲醇/水溶剂再溶解 (样品浓度约 1 g/mL)

　　0.45 µm膜过滤

　　50 mm x 2 mm RP18-柱，水 / 甲醇 + 5 mmol/L甲酸铵

　　LC-MS/MS ESI+，297 MRM +3 EPI 模式分析

　　同时鉴定和定量水果和蔬菜中300种农药及其代谢物

　　 • 76 •

　　果和蔬菜提取物中农药的定量分析。图4显示了不同水果和蔬菜提取物的例子，在苹果样品中发现了虫酰 肼（tebufenozide）并定量为11 µg/kg。为了确证虫酰肼的定量数据，其EPI谱被自动采集并与谱库中的图 谱比对。纯度符合度（Purity Fit）是确定谱库中的图谱与未知物的图谱符合的程度，如图5所示。用动态 背景减法（SBS）在检测MRM离子对后触发EPI扫描，这样对于确证特别是对于共洗脱化合物能够获得高 质量的MS/MS图谱。