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单克隆筛选的几种方法

2020.12.16
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

  单克隆筛选是新一代细胞克隆筛选和挑取技术,细胞克隆筛选系统能够更少时间里,自动化筛选并挑取更高水平表达的细胞克隆,拥有5组荧光通道,可以同时使用3组,细胞克隆筛选系统避免有限稀释,快速高效筛选挑取杂交瘤克隆,建立稳定细胞株,干细胞及特殊表面标记细胞挑取及昆虫细胞筛选挑取。

  单克隆筛选方法有有限稀释法,半固体培养基挑选法,以及流式细胞术挑选法等。这其中有好多需要关注的点,例如挑选细胞的参数,挑选方法本身对细胞的损伤等。所以说,一个高效的筛选方法绝对能让工作效率提高好几倍。

  有限稀释法是目前常用的一种常规武器,这种方法筛选细胞的好处就是基本上不会伤害细胞。整个过程中细胞所经历的,也仅仅是在移液枪头中的短暂停留,因此几乎是零损伤。不过,这种方法的弊端也是显而易见,就是效率问题。首先是铺板效率,虽然不到一分钟能将一块96孔板铺满,但是一般来说96孔中有细胞的概率在2/3左右,其中单个细胞的概率就更小了,这些细胞要经过一段时间的生长,抗体分泌之后,在其上清液中去检测抗体含量,流程耗时太长,且效率低下,但是在没有更先进的设备的时候,这还是目前好的选择。

  流式细胞分选仪是挑选细胞的不二法宝,在细胞分析分选当中占有重要一席。在很多抗体研发企业中,也都有用到流式细胞仪来挑选高产细胞株,在这一应用领域有其独特优势,分选快速(每秒上万个细胞)。


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