液相色谱的操作步骤和注意事项

1).首先对流动相进行过滤，根据需要选择不同的滤膜，一般为有机系和水系，常用的孔径为0.20um和0.45um。

　2).对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。　　

 3).正常情况下，仪器首先用甲醇冲洗10-20分钟，然后再进入测试用流动相(如流动相为缓冲试剂，则要二次重蒸水冲洗10-20分钟，直至色谱柱中有机相冲净为止)。

　4).一般情况下，流动相冲洗20-30分钟后，仪器方可稳定，zui重要的是仪器基线走后，方可进样测试。

　5).同时进两针标样，将其结果相比较，其结果的比值在0.98-1.02之间后，就可以正式进行样品的测试了。

　6).样品测试结束后，就要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂，同样也要用重蒸水清洗10-20分钟，方可用有机相进行保护，否则，有损色谱柱。

　7).关机时，先关计算机，再关液相色谱。

　8).填写登记本，由负责人签字。

1. END注意事项1).流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。

• 　　2).柱子是非常脆弱的，*次做的方法，先不要让液体过柱子。

• 　　).所有过柱子的液体均需严格的过滤。

• 　　4).压力不能太大，不要超过150kgf/cm2.

• 　　5).因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，所以，每次由有机相变流动相或流动相变有机相均需用蒸馏水清洗。