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肽厉害-SARS-CoV-2多肽池在新冠疫苗研发的多种应用

2021.3.01
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

     周末结束了,享受了周末的狂欢,周一又要步入学习和工作了。临出门还反复查看手机、钥匙,光速跑下楼,OMG,口罩没带,天啦,这可是比没带手机还让人绝望的事情,怎么办,只能折返。。。。。。谁能想到2020年男女老少必备的单品是口罩,没有口罩,出门感觉像是在裸奔。这全是SARS-CoV-2惹的祸,时至今日这个罪魁祸首仍在全球肆虐。之前小编给大家整理过SARS-CoV-2的最全科研用蛋白以及和核酸检测试剂盒,今天小编再接再厉,带大家了解一下SARS-CoV-2多肽池。

 

       多肽池(peptide pool)是一组免疫刺激性抗原簇,是大量特定长度且序列不同的小肽的集合,是药物设计、蛋白质间相互作用、生物化学及药物应用等方面一种强有力的工具,同时在药物筛选、确定靶位、抗原表位制图、研制疫苗等方面也有着广泛的应用。现在新冠病毒疫苗研发如火如荼,免疫学专家Mabtech可为您提供最全SARS-CoV-2多肽池,助力新冠疫苗研发,简直不要“肽”厉害!

 

       棘突蛋白(Spike protein,S)、核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,N)和膜蛋白(Membrane glycoprotein,M)是SARS-CoV-2病毒的重要结构蛋白。S蛋白有两个结构域S1和S2,受体结合域(receptor binding domain, RBD)属于S1的一部分。S蛋白不仅是SARS-CoV-2病毒的结构蛋白,也是形成适应性免疫反应的关键靶点。除了结构担保,SARS-CoV-2基因组也编码其他蛋白质,例如非结构蛋白ORF3a, 病毒逃逸蛋白ORF7a。

 

 

 

       针对SARS-CoV-2的结构组成,Mabtech可提供多种肽池:

 

货号名称说明
3629-1SARS-CoV-2 S1 scanning pool
SARS-CoV-2 S1 扫描肽池
166来自人类SARS-CoV-2病毒的多肽。这些多肽覆盖刺突蛋白(S)的S1结构域(13-685aa)。肽库以冻干粉的形式提供,分为两瓶,每瓶各含有83个多肽。纯度为80%
3620-1SARS-CoV-2 S2 N defined peptide pool
SARS-CoV-2 S2 N定义肽池
41条来自人类SARS-CoV-2病毒的多肽。这些多肽源于刺突蛋白(S)的S2结构域和核衣壳蛋白(N),其纯度大于95%。
3622-1SARS-CoV-2 S N M O defined peptide pool
SARS-CoV-2 S N M O定义肽池
47条来自人类SARS-CoV-2病毒的多肽。这些多肽源于刺突蛋白(S)、核衣壳蛋白(N)、膜蛋白(M)、ORF3a和ORF7a,其纯度在60-99%之间

 

 

       扫描肽池(Scanning pools)和定义肽池(defined pools)的区别:扫描肽池不需要预先了解表位,能覆盖整个蛋白质的结构域。扫描肽池是由11个氨基酸交叠组成15个mers,跨越整个蛋白质。15个mers能刺激CD4+T细胞,同时,当加入培养的细胞中时,它们可以被蛋白酶修饰成较短的肽,从而刺激CD8+T细胞。扫描肽池不受宿主限制,不仅可用于评估人类T细胞反应,也可用于其他动物模型。定义肽池含有与人类HLA结合的选定肽。S2 N多肽池基于SARS-CoV-1的数据,所选表位与SARS-CoV-2 100%同源。S N M O多肽池是基于IFN-γ ELISpot筛选SARS-CoV-2恢复期COVID-19患者的PBMC确定的表位。

 

       与其他品牌相比,Mabtech开发的SARS-CoV-2肽库功能经过验证,可用于ELISpot/FluoroSpot!

 

 

       用SARS-CoV-2S1 S2 N肽池对来自3例先前经PCR证实为SARS-CoV-2阳性患者的外周血单核细胞(PBMC)及未感染COVID-19健康人体内的外周单核细胞(PBMC)进行刺激(每孔250,000个细胞),植物血凝素(PHA)刺激的细胞作为阳性对照(每孔50000个细胞),未刺激的细胞作为阴性对照(每孔250,000个细胞)。使用IFN-Y/IL-2 FluorOSpot 分析法在Mabtech IRIS上对T细胞应激反应进行分析。

 

       IFN-Y/IL-2 FluorOSpot 分析法在Mabtech IRIS上对T细胞应激反应进行分析

 

       人干扰素γ(IFN-γ)的ELISpot结果。对全血中CD8+细胞进行分离后,将分离出的细胞加入预先包被好人干扰素γ(IFN-γ)的ELISpot板中(每孔300,000个细胞),孵育过夜。左图无Mabtech肽池,右图有Mabtech肽池。

 


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