植物组织提取高质量的DNA五大方法详解（一）

     蛋白质纯化是旨在从细胞，组织或整个生物体中分离出一种或几种蛋白质。蛋白质纯化对于表征目的蛋白质的功能，结构和相互作用至关重要。蛋白质分离与提取是生命科学研究基础中的基础。植物细胞由于存在细胞壁的结构，因此比动物细胞蛋白的提取相对复杂。

       提取植物中的DNA对植物基因工程，植物生理、病理研究等方面具有重要作用。不同植物的核酸结合蛋白的情况各不相同，因而需要采取不同的提取方法。植物中次生代谢产物多酚类化合物会影响DNA降解，同时多糖的污染也会影响植物DNA纯度。因此从富含多酚和多糖的植物组织中分离获得高质量的基因组DNA难度较大。一般常用方法如下：

       一，CTAB 法

       CTAB法即十六烷基三乙基澳化按法，CTAB是一种阳离子去污剂，它能与核酸形成复合物，这些复合物在低盐溶液中会因溶解度的降低而沉淀，而在高盐溶液中可解离，从而使DNA和多糖分开，再用乙醇沉淀DNA除去CTAB。在该法中使用的聚维酮 (PVP)与多酚结合形成复合物，从而可有效避免多酚类化合物影响DNA降解。

       二，SDS 法

       相比于CTAB，SDS法更加方便简单。近年来科研者们提出了利用SDSTris-Cl-EDTA直接裂解细胞使其释放出DNA的方法，后续的DNA纯化过程中通常采用酚/氯仿处理，但对于植物DNA纯化不是一个很好的选择，因为酚的使用可降低DNA的提取效率和纯度。实验证明，若采用较大的离心力和较长的离心时间，然后用氯仿一异戊醇代替酚来去除变性蛋白质，可以克服由于酚的掺入及残留对以后酶切带来的困难。

       三，氯化节法

       氯化节法的提取获得率较高。原因可能为氯化节不仅与植物细胞壁上的多糖经基反应生成醚，而且与细胞液中多糖物质反应破坏糖链，有利于DNA的释放和提纯。

       四，高盐低pH法

       高盐低pH法是指以无机盐和异丙烯为提纯试剂提取DNA的方法。通常采用的无机盐为低pH的醋酸钾，用来沉淀蛋白质。该方法方便省时，所需样品量少。

       五，果胶酶法

       利用果胶酶对植物破碎细胞进行抽提的一种技术。

       如何提取植物组织中的可溶性蛋白质和代谢物？如何更快更简便的获得植物PCR扩增所需的模板？艾美捷科技作为专业的生命科学领域解决方案供应商，为您推荐植物组织提取试剂盒和升级版植物快速PCR试剂盒。

       植物组织提取试剂盒特色与优势：

       1.从各种干燥和新鲜植物组织中提取可溶性蛋白以及其他生物分子和代谢物的有效方法；

       2.无需使用液氮，操作快速简单；

       3.易于使用，可确保恒定的蛋白质产量〜2-9 mg / ml（取决于样品类型）。