健 康
肥胖、糖尿病、心血管疾病以及其他代谢综合征范畴内的相关疾病，是关系到我们健康最紧迫的问题，其中代谢相关的激素由内分泌系统的各个器官，包括脂肪细胞、胰腺和胃肠道分泌。在调节能量、食物摄取量和全身代谢方面发挥着重要作用。
近些年，随着II型糖尿病的发病率上升，代谢类疾病甚至已经影响到儿童和青少年人群。所以加快代谢综合征相关的激素研究，对代谢类疾病的治疗和预防都至关重要。
因为维持系统的平衡状态需要多个信号分子，所以没有一个生物标志物足以定义一个系统。另一方面，基于传统的检测手段，由于样本容量的限制，一次测量多个分析物是难以完成的。
▲图1：各种器官向大脑分泌的多种信号有助于维持食物摄入和能量消耗之间的平衡，调节体重和新陈代谢
为了克服这些挑战，基于Luminex®xMAP®磁珠技术的MILLIPLEX®MAP多因子检测试剂盒，可以实现同时定量代谢相关分析1。MILLIPLEX®代谢激素检测试剂盒的主要优势是包含：总GLP-1的检测和活性GLP-1的高灵敏度检测。
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在此案例中，我们向您介绍一个多重、稳定、灵敏的代谢激素多因子检测试剂盒，可以同时检测包括如下13种代谢激素：
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● 胰岛激素 |
amylin (active or total)， C-peptide, glucagon, insulin 与pancreatic polypeptide (PP) |
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● 胃肠激素 |
active ghrelin, gastric inhibitory peptide (GIP), glucagon-like peptide 1 (GLP-1, active or total), 与 peptide YY (PYY) |
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● 脂肪因子 |
leptin, IL-6, monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1), 与 tumor necrosis factor(TNF ) |
除了评估整个试剂盒的准确性和精密度外，我们还比较了MILLIPLEX®活性GLP-1高灵敏度试剂盒与默克金标准高灵敏度活性GLP-1的ELISA法试剂盒，得到的检测结果一致（货号：EZGLPHS-35K）。
1 材料和方法
实验检测使用：MILLIPLEX®人类代谢激素检测试剂盒(货号：HMHEMAG-34K)，实验按照试剂盒说明书进行操作。
为了确定代谢激素水平与食物摄入量的关系，我们采集了正常受试者(n=20)在禁食一晚或标准早餐后一小时的血液样本。在采集的血样中立即加入蛋白酶抑制剂(DPPIV抑制剂、AEBSF、蛋白酶抑制剂)。根据检测方案，使用MILLIPLEX®人代谢激素试剂盒，对血清和血浆样品进行分别进行检测。
同时，针对同一份样本使用默克公司高灵敏度GLP-1 ELISA试剂盒(货号：EZGLPHS-35K)进行检测，按照试剂盒说明书进行操作。
2 结 果
使用血清基质中连续稀释的每种分析物的标准，制备标准曲线，以测定相对于分析物浓度的测定反应(以平均荧光强度[MFI]测量)(图2B)。
标准曲线为所有因子设定用于检测的线性度超过3~5个数量级（图2A），试剂盒内所有因子未见交叉反应(数据未展示)。根据检测数据显示，MILLIPLEX®回收率达94%~107%，精度好(小于10%的板内变异系数[CV]和15-20%的板间变异系数(图2A)。
▲ 图2A
▲图2B:验证数据(2A)和标准曲线(2B)使用血清基质稀释，并使用MILLIPLEX®MAP 人类代谢激素试剂盒（Cat. No. HMHEMAG-34K）
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