Western Blotting技术已经问世四十多年了，依然是蛋白分析中最常用和主流的方法。但近些年Western
Blotting数据重现性，稳定性，定量准确性等问题，也使这项技术被推到了风口浪尖，同时也有很多文章因为Western
Blotting数据的问题而撤稿，而为了尽可能提高Western Blottig数据的可靠性和准确性，期刊杂志对于接收涉及Western
Blotting技术数据的文章也提出了新的要求。
接下来我们看看都要哪些要求：
1.不建议跑平行胶，因为平行胶和剥离膜孵育体系，操作条件的不一致，影响定量的准确性，因此最好内参和目的蛋白要在同一张印迹膜上
2.选择宽态范围的方法，确认信号强度与所上样量之间的线性关系，例如用胶片做化学发光方法的动态范围就很窄，不建议使用：
数字成像相比胶片动态范围更宽、定量更准确
3.强烈推荐使用总蛋白进行归一化，因为看家蛋白容易受处理条件影响而发生变化，影响定量的结果，使用总蛋白定量更真实地反映目标蛋白表达量的变化
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