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连续监测法中酶活性浓度的计算有哪些注意事项?

2021.4.22
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

在酶反应过程中,用仪器监测某一反应产物或底物浓度随时间的变化所发生的改变,通过计算求出酶反应初速度的方法。

连续监测法优点之一是计算方便,不需作标准曲线或标准管,用分光光度计监测酶反应过程时,很容易求出反应体系中每分钟吸光度变化,根据摩尔吸光系数可求出△A(相当测定物质变化的微摩尔数)。

计算中要考虑标本的稀释倍数,还应考虑光径不同时对△A的影响。

图片1

ε为微摩尔(线性)吸光体系

△A为吸光度变化

ν为标本体积(ml)

V为反应体系体积(ml)

L为光径(cm)

后面几项皆为常数,叫做酶活力浓度测定转化因子:

图片2


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