1、为什么说“半定量双联法”是检测便隐血的最佳方法?如何进行结果判断?
答:可分别参见表1和2
表1
免疫法 | 化学法 | |
特异性 | 高 | 低 |
灵敏度(ug/g stool) | 高(0.1) | 较高(50) |
对上消化道出血的漏检(检出率) | 会(约60%) | 不会(100%) |
钩状效应(Hook’s效应) | 有 | 无 |
半定量 | 不能 | 能 |
检测成本 | 高 | 低 |
大批量人群普查 | 不适合 | 适合 |
保存、效期 | 不易、短 | 易、长 |
表2 . 结果判断
免疫法 | 化学法 | 分析 |
阳性(+) | 阳性(+) | 确定为阳性结果,化学法可查出其出血程度(半定量) |
阳性(+) | 阴性(-) | 确定为阳性结果,但其检体隐血的含量极微少 |
阴性(-) | 阴性(-) | 确定为阴性结果 |
阴性(-) | 阳性(+) | 1、此病人为上消化道微量出血(此种情形可能性较低)2、化学法的阳性结果为食物或药物所引致的假阳性(此种情形的可能性较高)。3、Hook’s效应导致的免疫法为假阴性。 |
2、检测便隐血的方法是否越灵敏越好?最佳检测便隐血的灵敏度是多少?
答:不是。用5lCr标记检查正常人粪便中每天血液丢失量为0.5±0.4ml(最多可达1.5ml),相当于每克粪便的含量为100-900ìgHb,平均为500ìgHb,故试剂的检测灵敏度在50ìgHb/g stool时能查出所有病理及部分生理状况下的人群,而再提高灵敏度可能只会增加检测的非病理状况下的阳性。
3、两类方法实测灵敏度的差异。
答:免疫法的检查终产物是经过标本稀释(已做了500倍左右的稀释处理)后的产物。其实测若以灵敏度为0.1ìgHb/g stool计算,其最终测得最低值也为50ìgHb/g stool。故其粪OB检查的阈值应定为50ìgHb/g stool较合适。
4、何为钩状效应(Hook’s效应)?其对实验结果的影响及解决方法。
答:Hook’s效应为单克隆抗体与所抗的Hb抗原不匹配或消化道出血过多,抗原过剩时造成的假阴性结果。其解决方法为将标本继续做1:500倍的稀释后再做实验。
5、为什么免疫法会漏检上消化道出血?
答:上、下消化道出血以胃底部为分界。
上消化道出血:
每天出血量与检测阀值
胃 | 结肠 | |
卟啉实验 | 2ml | 2ml |
愈创木脂 | 10-20ml | 0.5ml |
免疫法 | 100ml | 0.25ml |
6、在三种化学方法中,为什么选择“匹拉米洞法”作为首选方法?
答:目前常用的三种化学方法及各自特点见下表:
联苯胺 | 愈创木脂(水溶、非水溶) | 匹拉米洞 | |
致癌性 | 有 | ? | 无 |
灵敏度 | 高 | 低 | 中 |
假阳性率 | 高 | 中 | 低 |
成本 | 低 | 高 | 中 |
商品化产品 | 无 | 有 | 有 |
生产质控 | 难 | 难 | 方便 |
7、匹拉米洞半定量值分几级?
答:分5级。
8、如何避免新鲜蔬菜对化学法的干扰(假阳性)?
答:多煮并煮熟蔬菜,可全面去除其干扰。
9、如何进行便隐血标本的稀释处理(等渗盐水、蒸馏水、低渗缓冲液)?
答:化学法用蒸馏水,免疫法用低渗缓冲液;二者禁用等渗盐水。
10、为什么要多点采集样本?
答:避免采样误差。
11、为什么说“双联法”是最适合大批量肠癌筛查的首选方法?
答:实验成本低,准确性高、灵敏度高,操作、质量管理方便等。
12、免疫法有无假阴、阳性?
答:免疫法也有假阳性,如饮用啤酒等;若检体的pH值改变:pH≤3时呈假阳性、pH≥10时呈假阴性;大分子蛋白可能包裹Hb并使之不易暴露,直接影响Hb与Hb抗体的结合而导致胶体金法假阴性等。大家可以多做实验进行探讨。