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关于血球维修的一些体会(二)

2021.4.29
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

    4)废液排除不干净,像东亚,丹能,雅培等设备都有一个或者几个废液池,先用负压把计数池和冲洗后的废液吸到这里,然后等待正压的到来排出机器外。计数池的废液不能排出干净,那么就要考虑负压问题和计数池的密封和泄漏,废液池不能排出干净就要考虑正压,两者都不能排出干净就都要考虑,检查的重点首先就是废液池本身,密封圈是否完好和安装到位,剩下的就要检查相关的电磁阀和管道了,电磁阀堵塞或者不良,会造成无法把全部压力加到废液池上造成废液排出里不足,也就排不干净,注意的是,如果无法将全部的正压加到废液池上的话,压力传感器是不会报警的,因为这不是泄漏。曾工就曾经为了这个问题折腾了一个晚上,天亮了发现废液池密封圈由于操作者清洗后没有安装好造成的压力泄漏,在次之前把问题想的太复杂了,搞来搞去折腾了很久。其实,有这样的机会整晚上的捣鼓一台机器机会很难得的,遇到的问题越多就相当于经线越多,检查和解决方法越多就相当于纬线越多,良好的思路和习惯还有记忆力就是相当于经纬结点,那么,随着时间的延续这张经验大网 会越来越密集的编织下去,那个时候我何惧哉?!对我们有益无害的。

    5)堵孔和气泡,在使用时间和体积进行计数定量的机器上,像东亚,雅培,丹能等大部分机型上,都有定量管(或者叫计数管)液体通过定量管上下的光电耦合器来进行体积定量,在规定的时间内通过认为是合理的,超过规定的时间就会认为是堵孔造成的,而在低于规定的时间内通过,则被认为是有气泡造成的流速过快,因为纯液体是不会这么快通过的。以前的帖子已经讲过,负压过高会报气泡的,这是在无负压报警监控的机器上,管道的泄漏,计数管得密封不好,或者小孔破碎都会造成气泡。真正意义上堵孔是小孔被杂质堵塞,这样的情况通过自动或者人工反冲可以得到验证,水流无力不直,或者干脆成滴水状,这些都是小孔堵塞的证据,可以通过浸泡,冲洗结合显微镜观察得到很好的处理,有些小孔跟其它的部件结合在一起,因此只能浸泡或者人工反冲,要注意的是不要用力过大冲破小孔,把维修变成灾难。有些堵孔则是由于负压不足或者是管道泄漏引起的,管道泄漏可以通过插拔来验证,明显感到不紧就要剪掉部分重新插,计数池的密封不好也会造成负压不足,计数管的上下端密封不好也会如此的,负压不足的情况很复杂,有可能是负压泵本身不好或者负压监测出现漂移造成的,还有就是其他部位的泄漏,例如f820的负压瓶密封不好造成的负压不足,电路的漂移造成负压不足,其它部位的管道或者电磁阀密闭不严造成的泄漏等等,需要逐一排查,方法当然是隔离法最为实用方便。在雅培机器中有很有意思的提示,跟软件和设计理念有关,不仅报告堵孔和气泡,还会报告流量错误,会监测小孔到下面的光藕的时间t1,和两个光藕之间的时间t2等等,这些提示对维修有很大的帮助且对结果的准确性也是很好的验证。还有的机型干脆报代码,像cd1200的00,01,02等等都跟上述有关。在采用注赛泵的设备上,密封圈的良好直接影响到上述故障,前提是这个机器要有堵孔和气泡报警,像abx没有这样的报警提示,只能根据其他的提示和数值的高低来判断。

2、计数偏高或偏低或不稳定重复性差

    1)计数偏高,这里指的是总体的偏高,不是针对特例。一个或者几个项目在一段时间内或者一批标本里面总是偏高,那么首先要分析标本人群的特殊性,例如白细胞增高是不是发烧感染人群,血红蛋白增高是不是高原人群等等,排除这些就需要从试剂和仪器还有抗凝剂几个方面进行考虑。抗凝剂不好会造成分类和血小板的增高,严重的(错用抗凝剂)会导致红细胞和白细胞增高。试剂不好一般体现在错用了稀释液和溶血剂上,仪器本身一般不会造成偏高,除非电路上错误的调整或者定标系数被错误更改,曾经就有医院定标,定标后的系数应该是0.95,结果写成9.5,这样每个标本的实际计数结果都被乘以9.5,造成有些机器无法显示出现*****或者++++或者DIL等提示,呵呵,不出才怪呢。

    2)计数偏低,一般是堵孔,负压不足,管道的泄漏等等因素,堵孔的情况一般出现在abx机器上,一般偏低1/3到2/3,在显微镜下明显看到小孔周围的沉积物,需要浸泡或者其他方式处理。拆卸小孔的时候一定要注意,安装的时候一定要小心不要挤破小孔。在血红蛋白比色和细胞计数池分离的仪器上,可以在池内进行高浓度的清洗作业,因为不用担心计数池的透光性,但是在血红蛋白比色和细胞计数池为一体的机器上绝对不可以这么做,影响计数池的透光性,造成血红蛋白不正常或者无法比色。

    3)不稳定这种情况首先检查进样系统是否造成的进样本身不准确,单纯的白细胞计数不稳定就要考虑溶血剂加量是否稳定,注塞泵或者隔膜泵密封是否完好,单纯的红细胞部分计数不稳定,要考虑二次稀释的加量问题,全部结果不稳定采样系统的注塞泵和隔膜泵是否良好,稀释液的加量是否准确,相应的注塞泵和隔膜泵是否完好,同样加样系统的问题也会影响到计数偏高或者偏低,维修过程中也是要考虑的。

    4)重复性差的问题,首先要考虑上述原因,其次,滥用维修手册的行为也是应该受到指责的,根据维修手册上的指示但没有相应的配套标准品等手段就调整增益或者灵敏度,会造成仪器的线性变差,重复性变差。

3、异常响声或停止:仪器会报各种各样的错误,马达/泵/压力/试剂/甚至电压不对都会突然停止工作,并提示你进行相应的操作来解决这类问题。马达的行程不到位,或者在规定的时间内没有到位都有可能造成停机,都是根据软件的设定。这个时候就要观察什么原因造成的上述现象,液体泄漏造成的结晶阻碍马达的运行?还是皮带松弛?还是负载(泵的腔体或者电磁阀堵塞造成不能吸取或者排泄从而形成运动不畅),根据不同的检查结果作出相应的处理。压力的不好会造成运动不畅或者干脆报警停机,试剂的监测也是很重要的,没有试剂肯定会停止的,因为没有做下去的必要了,有些仪器对各个电压的监测也是很重视的,血红蛋白电压,计数电压,等等,超过范围就会报警在有的机器上干脆就 无法操作了。

4、试剂和图形问题:试剂对于结果的准确性非常重要,在二、三分类的机器上,固定界标的设备对稀释液的要求非常严格,直接影响到白细胞的分类和红细胞压积和平均体积的计数,直接反映在直方图上,白细胞的直方图不能拉开就会形成单核细胞的增高,分类不准确,同样红细胞和血小板的图形也不好,影响到hct.rdw pdw,pct等结果的准确,严重的还会导致血红蛋白的析出和结合造成血红蛋白不准确。在浮动界标的机器上,也会同样造成影响,不分类增多结果自然不准确,这些在以前的帖子上都有很多图形的,这里就不爱发表图形了。对于溶血剂不好对分类影响和图形影响都很大,且对血红蛋白的准确性影响也很大,不要认为可以通过调整定标系数就可以弥补试剂质量的缺陷。对于五分类的机器稀释液的作用要求有的降低了,有的反而因为需要加入鞘液而变得更为复杂,像雅培的(纯激光法)cd3700需要鞘液、稀释液、溶血剂和清洗剂,而cd3200只需要稀释鞘液、溶血剂、清洗剂,但在其他染色法的五分类当中稀释液、分类试剂(两种或以上)溶血剂,清洗剂如果有更多的项目,试剂可以多达10几种。以sf3000为例,分类试剂分fd1,fd2,ba三种,而abx需要eo和ba两种,advia120开通全部项目的话要超过10种。一般染色法的五分类机器在分类的时候一般将淋巴、中性、单核、嗜酸细胞分为一个检测通道,通过嗜酸试剂和稀释液来分类(sf3000是FD1和FD2,ABX是EO试剂),因此4分类不准确或者干脆不出,就应该先考虑这些试剂,更换新的批号或者厂家看看再说,对于鞘流系统的清洗也很重要(鞘流池、鞘流动力分配系统、混合抚育系统都需要检查),更有甚者需要进行增益或者灵敏度的调整和激光发射接受距离和角度的调整,这些不是一般工程师所能掌握的。嗜碱细胞的计数一般在单独的通道进行,有的还结合白细胞总数的测定,如果嗜碱细胞或者白细胞总数有问题,首先就要检查这个试剂(SF300和ABX都是BA试剂),然后才是计数通道(SF3000是鞘流通道,ABX采用电阻法,需要根据三分类的检查方法进行)。平时维修的时候多看图形,维修之前做几个标本把图形数据保留下来(最好不要通过电脑传输的,采用机器原来的格式,因为很多转换软件对图形的准确性不高)维修之后再做同样的这几个标本,观察图形的变化以及分析和找出原因,为日后的维修积累经验,从玉隆教授和其他检验前辈的书籍也是很好的学习材料。

5、本底问题,这类问题是经常出现的,其实这类问题的解决纯粹是耐心细致程度的问题,不是什么高难度,往往是急躁造成无法处理好,极少数是因为电路引起的。处理这类问题的思路是,首先分析是否是试剂问题,更换试剂或者用注射用生理盐水替代就可判断出,注意不要用蒸馏水,因为蒸馏水不导电,在电阻法的机器上根本检测不出是否是试剂问题,无论怎么做蒸馏水的结果都是0的。在排出了试剂问题后,地线问题就成为主要,不止一个人跟我讲,地线我接好了,接到自来水管上了,呵呵,临时这么接是可以的,但是长期下去会造成接触不良使所谓的底线成为摆设。有些医院有预埋的标准地线,但是由于时间长远,地线的维护保养变差,也会使抗干扰能力变差,检查方法有手接地法,就是用自来水清洗双手,一只手压紧仪器的机壳螺丝,一只手尽可能的触摸墙壁,如果本底明显的降低,基本上可以断定是地线问题。当然,在电磁环境不好的实验室里面,这种方法不怎么见效,可以采用临时接地法,临时将铜线一段接机壳,另一端接金属的自来水管且保证接触的可靠有效性,拧开水龙头让水流动,或者遇到塑料水管可以把铜线的一端伸到水龙头下让水流出冲洗铜线,这样可以模拟底线效果,当然这种方法不可长期使用,浪费水资源也是不应该的。排除了底线干扰,就要考虑噪音干扰,检查噪音干扰没有很好的办法只能用金属屏蔽相关的计数池和电路来测试观察。计数池,小孔的密封,管道的密封松动都会造成本底高。


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