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粪便隐血试验(FOBT)知多少

2021.5.06
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身


    近年来,直肠癌在我国的发病率和死亡率不断上升,对其进行早期筛查和诊断是十分重要的事情。FOBT是早期筛查消化道恶性肿瘤及诊断各种原因引起消化道出血的重要检测手段,下面将对FOBT相关问题进行简单介绍。

    一、定义

    粪便隐血试验(fecal occult blood test,FOBT):上消化道出血量<5ml,粪便中无可见的血液,且红细胞被破坏,显微镜检查也未见到红细胞。需用化学法、免疫法等才能证实的出血,称为隐血。检查粪便隐血的试验称为粪便隐血试验。

    二、方法

    化学法:邻联甲苯胺法、邻甲苯胺法、还原酚酞法、愈创木脂法、匹拉米洞法等。
    免疫法:血红蛋白法、转铁蛋白法等。

    两种方法在方法学上互补,故大多数单位采用化学法+免疫法联合检测的方法。

    三、原理及优缺点

    1、化学法——邻联甲苯胺法

    原理:血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性,能催化过氧化氢释放新生态氧,将邻联甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。
    优点:
    方法简便易行,成本较低,显色深浅可反映出血量的多少。
    缺点:
    1)灵敏度较低,血红蛋白量需达到0.2~1.0mg/L。
    2)特异性差,食入动物血、肉类、含过氧化物酶的蔬菜、铁剂等易导致假阳性,服用大量维生素C或其他有还原作用的药物后易导致假阴性。

    2、免疫法——单克隆抗体(Hb)免疫胶体金法

    原理:采用特异性的抗原抗体反应及免疫层析技术,通过双抗体夹心检测原理来定性检测标本中出现的人血红蛋白(Hb)。
    优点:
    灵敏度高,血红蛋白达到0.2μg/ml 或0.03mg/g粪便时,即可呈阳性结果。特异性好,不受食物、药物等因素影响。
    缺点:
    1)消化道大量出血时粪便血红蛋白浓度过高(>2000μg/ml ),即抗原过剩,由于后带现象导致假阴性。
    2)上消化道出血后,Hb 经胃、胰、肠等不同 pH 消化液及肠道细菌、蛋白酶的作用约 24h随粪便排出体外,期间 Hb 同样易变性或消失,故常导致上消化道出血时FOBT假阴性。
    3)Hb存在于红细胞中,红细胞破裂后,才能被释放、被检测。红细胞的破坏程度直接影响检测结果,一部分难溶性红细胞的病理性出血不易被检测。

    3、免疫法——单克隆抗体(TF)免疫胶体金法

    转铁蛋白(TF)为什么可用于粪便隐血的检查?

    TF存在于血浆中,分子量约7.7万,属中分子量蛋白,健康人粪便中几乎不存在。因此只要其在粪便或者消化道内容物中被检测到,即说明存在消化道出血。某些消化道出血,即使出现红细胞不破裂导致Hb法检测呈假阴性,然而TF会随出血(血浆)进入到胃肠道中,用TF法则可检出。而且基础医学研究已经证实:多种癌症(包括消化道肿瘤)的血清和体液中的转铁蛋白水平升高,故由于消化道肿瘤并发的消化道出血用TF法更容易检测到! 

    原理:采用特异性的抗原抗体反应及免疫层析技术,通过双抗体夹心检测原理来定性检测标本中出现的TF。

    优点:
    1)灵敏度高,检测范围为40ng/ml~400μg/ml。
    2)特异性好,不受食物、药物因素影响。
    3)理化性质稳定,不易被胃酸破坏,免疫原活性不易被破坏。
    缺点:
    约有10%的患者转铁蛋白病理性降低,如遗传性转铁蛋白缺乏症、蛋白质丢失性疾病(肾病综合征、慢性肾功能衰竭、严重烧伤和蛋白质丢失性胃肠病)、严重肝病等,此时会导致试验假阴性。

    每种试验方法都有其优、缺点,将HB法与TF法联合使用有助于提高阳性检出率,减少假阴性,从而更好的为临床服务。HB、TF与双连(Hb+TF)a 阳性检出率比较如下:


    试验单位:卫生部北京医院


    四、临床意义

    1、消化道出血  药物致胃黏膜损伤(如阿司匹林等 )、肠结核、Crohn病、胃溃疡、溃疡性结肠炎、结肠息肉、钩虫病、消化道恶性肿瘤等。

    2、消化性溃疡与肿瘤出血鉴别  消化性溃疡FOBT可呈间断性阳性,而消化道恶性肿瘤FOBT呈持续性阳性。

    3、消化道肿瘤筛检  临床研究证明,消化道肿瘤患者FOBT阳性率平均为87%,美国临床生物化学会(NACB)建议对50岁以上人群进行1年1次或2年 1次的FOBT筛检。


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