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肠道寄生虫的形态识别

2021.5.06
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

张晓宁
粪便检查是诊断寄生虫病的常用方法,也是常规的一项实验室检查。肠道寄生虫病的诊断多依靠在粪便中找到虫卵、原虫滋养体和包囊,找到这些直接证据就可以明确诊断为相应的寄生虫病和寄生虫感染。粪便检查看似恶心,但是在很多方面有其独到之处。一些腹泻的患者经过粪便检查可能很容易做出最初的病因诊断,帮助我们确定到底是寄生虫感染还是一些特殊的致病原感染。

人芽囊原虫

人芽囊原虫(Blastocystis hominis)是自然界广泛存在的人畜共患寄生虫之一,于1912年首次从人类粪便中分离出来,并曾经被认为是寄生在人体肠道的一种非致病性酵母菌[2],1967年Zierdt等将其归为原虫,并认为人芽囊原虫可能与消化道疾病有关[3],之后人芽囊原虫逐渐引起人们的重视。人芽囊原虫主要通过粪-口途径传播,饮用水来源、卫生条件、经济发展水平以及气候等因素等都是影响人感染人芽囊原虫的重要因素。人芽囊原虫是肠道寄生原虫,在发展中国家的感染率为30%-50%,而在发达国家的感染率为1.5%-10%[4]。Hayashi等[5]研究发现,住院患者,特别是免疫力低下的,如经常做透析或化疗的患者,要警惕人芽囊原虫的感染。人芽囊原虫呈圆形或椭圆形,有时具有不规则边缘,包含占据几乎整个细胞的一个大液泡,压缩的细胞质在其周围形成颗粒状环。

蓝氏贾第鞭毛虫是是肠道中最常见的鞭毛虫,在被感染的人或动物的粪便、污染的表面上或土壤,食物或水中可发现蓝氏贾第鞭毛虫。蓝氏贾第鞭毛虫受到外壳的保护,使其能够在体外存活较长时间,并耐受氯消毒。虽然寄生虫可以以不同的方式传播,但饮用水和娱乐用水是最常见的传播方式。它可导致旅行者腹泻。蓝氏贾第鞭毛虫有两个诊断阶段:包囊长度为11-14µm的椭圆形,宽度为7-10µm,具有4个核和残余鞭毛,它是感染阶段。滋养体被描述为具有“泪滴”形状,并且长10-20μm,宽5-10μm。滋养体含有两个核,四对鞭毛。如果大便样品是新鲜的,检查时看到包囊阶段或滋养体阶段即可诊断。

球虫

球虫,可能是男性寄生虫,一般不会引起显著的致病作用,它们在粪便中以类似于包囊的形式出现,称为卵囊或孢子囊,呈细长的椭圆形。球虫能引起家畜、家禽、野生动物和人体的球虫病,随着对这类寄生虫病的深入研究和认识,其重要性日益显示出来[6]。人或动物可因食入受卵囊污染的食物和水而感染球虫[7]。在粪便排泄时,卵囊是不成熟的,通常只含有一个细胞(有时两个)。在排泄后进一步成熟,成孢子细胞分成两个(卵囊含有两个细胞)。成孢子细胞分泌囊肿壁,从而成为孢子囊;并且孢子被分裂两次,导致每两个孢子囊中有四个子孢子。感染是通过摄入成熟(完全形成孢子的)卵囊而发生。

隐孢子虫也称为crypto[8],是由隐孢子虫属(Cryptosporidium)引起的寄生虫病。它影响远端小肠,并且可以在免疫活性和免疫受损的个体个体中影响呼吸道,导致水性腹泻,其具有或不具有不明原因的咳嗽[9]。在免疫受损的个体中,症状特别严重并且可能是致命的。它主要通过粪-口服途径传播,通常通过污染的水[10]。最近的证据表明,它也可以通过呼吸道分泌物中的呕吐物传播[9]。隐孢子虫是在腹泻的HIV阳性患者中最常见的生物体,尽管直到1976年才被确定,但它是最常见的水源性疾病之一,并且在世界各地被发现。寄生虫通过环境上坚硬的微生物孢囊(卵囊)传播,一旦摄入,卵囊内的子孢子就会脱离(即被释放)并导致肠上皮组织的感染。隐孢子虫是一种人兽共患寄生虫病,主要通过粪便中的隐孢子虫卵囊污染食物、饲料和饮水而传播。人隐孢子虫病主要是由微小隐孢子虫(Cryptospordium parvum)引起[11],由于隐孢子虫种类较多,虫体小,光镜下缺乏明显形态特征。

阿米巴包囊及滋养体

阿米巴病是一种通过粪便中的包囊传播的肠道感染性疾病。症状包括发热、寒战、腹泻,有时引起出血、粘液及腹部绞痛。有些人可能只有轻微的腹部不适感或根本就没有症状。症状在感染后2周或以后开始。罕见的滋养体(有活动力的阿米巴)可以侵及肝、肺、脑,或引起肠穿孔而导致败血症。碘涂片显示溶组织内阿米巴包囊内含有4个核。结肠内阿米巴有较大的包囊,包囊内有8个核。溶组织内阿米巴(Entamoeba histolytica)是一种厌氧的原生动物,属于内阿米巴属[12]。主要感染人类和其他灵长类动物,估计感染全球总人数约为50万人。许多较早的教科书指出,总计有10%的世界人口被感染,但是后来认识到,这些感染者至少有90%是由于另一个种E.dispar引起的[13]。其活动阶段只存在于宿主和新鲜松散粪便中。包囊存活在宿主体外的水、土壤和食物中,尤其在潮湿环境中的后者。包囊很容易被高温和冻结温度杀死,在宿主体外只能存活几个月[14]。溶组织内阿米巴包囊平均12微米,从5-20微米不等,核与滋养体的核外形相似,包囊内可以有碘染色的糖原体和有着光滑边界的浓染体。结肠内阿米巴(Entamoeba coli Grassi)是人体肠道常见的共栖原虫,常与溶组织内阿米巴共同存在。其形态与溶组织内阿米巴相似,滋养体直径为15-50mm,核内含大而偏位的核仁和大小不一、排列不齐的核周染色质粒,胞质内含颗粒、空泡和食物泡,多含细菌但不含红细胞。包囊较溶组织内阿米巴的大,直径为10-35mm,核1-8个,成熟包囊偶可超过8个核。未成熟包囊内含糖原泡和草束状的拟染色体。

临床小结

粪便中发现寄生虫卵、虫体或原虫,则可确定有相应的寄生虫或原虫感染,这是有关寄生虫感染最直接的证据。然而日常工作中,对于粪便常规检验,我们检验人员经常秒杀,或许是其难闻的气味,我们都不愿意花过多时间浪费在粪便常规检验上。对于一份有诊断意义的粪便标本,草草报告结果完事,结果造成漏检,很少有粪便标本能检出寄生虫。检验人员不重视寄生虫检查的原因可能是没有可观的经济效益驱使,大多数检验人员更乐意采用免疫学或分子生物学、基因芯片技术等来诊断寄生虫感染。基层检验人员缺少对肠道寄生虫的了解,因此有必要加强基层检验人员的业务培训和专业指导,在临床检验中普及形态学知识,以提高检验人员对肠道寄生虫的鉴别水平,为临床提供有价值的诊断结果。

参考文献
[1]Jobst D,Kraft K.Candida species in stool, symptoms and complaints in general practice--a cross-sectional study of 308 outpatients.Mycoses.2006,49(5):415-420.
[2]Zierdt CH.Blastocystis hominis--past and future.Clin Microbiol Rev.1991,4(1):61-79.
[3]Babb RR,Wagener S.Blastocystis hominis--a potential intestinal pathogen.West J Med.1989,151(5):518-519.
[4]Yoshiya K,Ishikawa Y,Miura J,et al.Surgical management of acute hemorrhagic postbulbar duodenal ulcer after a previous major surgical procedure.Jpn J Surg.1985,15(5):348-354.
[5]Hayashi M,Inamori M,Goto K,Akiyama T,et al.Blastocystis hominis infection in patient with regular dialysis.J Gastroenterol.2006,41(6):605-606.
[6]Franzen C,Müller A,Salzberger B,et al.Uvitex 2B stain for the diagnosis of Isospora belli infections in patients with the acquired immunodeficiency syndrome.Arch Pathol Lab Med.1996,120(11):1023-1025.
[7]Robben PM,Sibley LD.Food-and waterborne pathogens:you are (infected by) what you eat!Microbes Infect.2004,6(4):406-413.
[8]"Cryptosporidiosis".Centers for Disease Control and Prevention.5 February 2009.
[9]Sponseller JK,Griffiths JK,Tzipori S."The evolution of respiratory Cryptosporidiosis:evidence for transmission by inhalation".Clin Microbiol Rev.2014,27(3):575-586.
[10]"Cryptosporidium:Sources of Infection & Risk Factors"United States Centers for Disease Control and Prevention.1 April 2015.Retrieved 16 January 2016.
[11]WIDMER G,SULLIVAN S.Genomics and population biology of Cryp?tosporidium species.Parasite Immunol,2012,34(2/3):61-71.
[12]Ryan KJ,Ray CG (editors).Sherris Medical Microbiology.4th ed.McGraw Hill.2004:733–8.ISBN0838585299.
[13]Anonymous.Amoebiasis Weekly Epidemiological Recor(WHO,Geneva).1997,72(14):97-100.
[14]American Water Works Association.Waterborne Pathogens.American Water Works Association.2006-06.ISBN9781583214039.

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