将特异的荧光抗体先固体于硝酸纤维素膜的某一区带，当该干燥的硝酸纤维素一端滴加样品后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该荧光体发生特异性结合，随着进一步的层析作用，用此抗原的另一个抗体对此复合物进行捕捉，多余的荧光抗体用其二抗进行捕捉，两次捕捉的位置分别称为质控线（C线）和检测线（T线）。当光源照射到检测卡上时，质控线和检测线分别激发出不同强度的荧光，光电转换器接收不同强度的荧光产生不同大小的电信号，电信号的强弱反映出待检测物的浓度，从而实现特异性的免疫诊断。
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