Sysmex CA-50血凝仪操作规程

一.《中国输血技术操作规程》（血站部分）对第Ⅷ因子凝血活性（FⅧ：C）和纤维蛋白原含量的质量控制要求：

（一）新鲜冰冻血浆的质量检查

1. 抽样：每月一次随机抽取新鲜冰冻血浆4袋，用于特殊检查。
   

2.检查项目：FⅧ：C

（1）质量标准：FⅧ：C应≥0.71U/ml

（2）测定方法：使用血凝仪测定

（二）冷沉淀质量检查：

1. 抽样：每批至少随机抽取4袋。
   

2.检查项目：FⅧ：C

（1）质量标准：FⅧ：C应≥80IU/袋

（2）测定方法：使用血凝仪测定

3.纤维蛋白原含量：

（1）质量标准：纤维蛋白原含量应≥150mg/袋

（2）测定方法：使用血凝仪测定

（三）上述内容可参照卫生部颁发的《中国输血技术操作规程》（血站部分）中第五章质量控制操作规程。

二.SysmexCA-50血凝仪测定FⅧ：C和纤维蛋白原含量的方法：

（一）SysmexCA-50血凝仪的特点：

1. 散射光的检测方法：最先进的检测方法，多在全自动血凝仪上使用。

2.凝固点采用百分比检测方式（自动扣除本底）。

A.对散射光变化小的（低纤维蛋白原）和变化速度慢的标本（凝固时间延长）均可准确检测。

B.可有效去除黄疸、乳糜血、高脂血症的干扰。

3.用生物活性法绘制标准曲线，通过标准曲线，仪器可自动换算FⅧ：C的活性百分比和纤维蛋白原的浓度。

（二）测试方法与流程

1. FⅧ：C
   

血浆5ul+缓冲液45ul+因子缺乏血浆50ul→仪器自动恒温1分，加APTT试剂50ul→仪器自动恒温3分，加氯化钙50ul→关盖自动测定

2.Fbg（纤维蛋白原含量）

血浆10ul+缓冲液90ul→仪器自动恒温3分，加Fbg试剂50ul→关盖自动测定

3.在实际的测定过程中，为避免微量稀释的误差增大问题，建议进行加量稀释，在取需要的量进行测定。

4.注意事项：新鲜冰冻血浆袋或冷沉淀袋从低温冰箱中去出后应立即置入37℃水浴中轻轻摇动，使之在6分中内溶化，立即取样用于FⅧ：C的测定或Fbg含量的测定。

（三）标准曲线的绘制（CA-50）：标准曲线是根据测试结果的凝固时间计算各运算项目的参数，如FⅧ：C的活性及Fbg的浓度。

1. 校正血浆
   

（1）如果使用市售的校正血浆，应遵循所附参数表的参数值和使用方法。

（2）如果自配FⅧ：C的校正血浆，取20名以上健康人的新鲜混合血浆，按9：1的比例加入3.8%的枸橼酸纳抗凝剂。此血浆的FⅧ：C活性认定为100%。

2.标准曲线数据的求法：通过事先测试已知活性（或浓度）的标本，求出标准曲线的数据。校正血浆通过几次对倍稀释即可获得不同活性（或浓度）的式样，分别取相应的量进行FⅧ：C（或Fbg）的测试。以测定结果为依据，输入标准曲线数据并打印曲线确认。

FⅧ：C计量单位的说明：

1. 临床上通常定义正常人的混合血浆的FⅧ:C的活性为100%,对等于1lu/ml,即:

FⅧ:C100%=1lu/ml

2.新鲜冰冻血浆质量质量标准:

FⅧ：C≥0.7IU/ml对等于FⅧ：C≥70%

3.冷沉淀质量标准：

FⅧ：C≥80IU/袋